动物生理学-蛙心灌流实验报告

一、实验结果L正常心搏曲线

2、滴加

0.65%NaCl溶液Jnacl

3、滴加2%CaC12溶液2滴

4、滴加1%KC1溶液

6、滴加

0.01%Ach溶液

二、分析与讨论

2、

1.正常心搏曲线

3、从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱，再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点，可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病.

4、滴加

0.65%NaCl溶液滴加065%NaCl溶液后,心跳减弱，这是由于用

0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱

3.滴加2%CaC12溶液2滴加入CaC12后，心跳略微增强细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用Ca2+浓度增高时，Na+内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低Ca2+浓度增高使Ca2+内流增多，心肌收缩能力增强

4.滴加1%KC1溶液滴加1%KC1后，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度也逐渐下降这是因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋一收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低所以心搏曲线振幅减小

5.滴力口

0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增力口,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强

6.滴加

0.01%Ach溶液滴加乙酰胆碱后，蛙心收缩减弱，心率减慢其机理为乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱

7、加2滴

0.01%阿托品和

0.01%Ach与只加乙酰胆碱相比，加了阿托品后再加乙酰胆碱的牛蛙心脏跳动无明显变化因为阿托品能与心肌细胞膜的M胆碱受体结合，妨碍乙酰胆碱与其结合，从而起抗胆碱作用，但由于心脏本身的缘故使每次收缩的时间增加了且在整个实验过程中，该牛蛙的心脏时不时的会停止跳动，影响实验结果

三、结论本次实验首先要制备离体蛙心，制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动其实质是在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增大，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降但是有时候蛙心插管内液面波动不明显，其主要原因有

（1）插管内尖端出现血凝块此时应用接有针筒的长吸管将血凝块吸出，并将新鲜的任氏液注入，直至血液颜色变浅；

（2）插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等地方解决方法为将插管重新插入心室；

（3）插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁解决方法为将插管稍稍外提，使插管□正好处于心室腔内，且开口正对着液体喷射方向细胞外液高Ca2+,促进Ca2+内流，胞浆Ca2+浓度升高，Ca2+与肌钙蛋白的结合数量增加，心肌收缩力增加，当胞浆Ca2+浓度持续升高时，Ca2+与肌钙蛋白结合后不解离，心肌处于持续收缩状态而形成钙僵；肾上腺素促进Ca2+内流，提高肌浆中Ca2+的浓度，增加心肌收缩力，肾上腺素又可促进Ca2+泵活动,降低肌浆中Ca2+浓度，促进Ca2+与肌钙蛋白的解离，使心肌舒张完全

4.1%KC1细胞外K t——K与Ca在细胞膜上有竞争性抑制一一K抑制细胞膜对Ca转运--------进入细胞内Ca（----------心肌的兴奋收缩联过程减弱-------心肌收缩力![K]f------膜内外k浓度梯度减小-------静息电位绝对值减小-------兴奋性f[K]f——Ca内流受抑制一一0期去极速度和幅度降低一一传导性降低

5.2%CaC12即180mniol/L（正常2mmol/L）细胞膜外Na与Ca有竞争性抑制细胞外液Ca浓度t一一细胞兴奋时内流Ca t一一心肌收缩力t

6.

0.65%NaC..lllmmol/L细胞外Ca I-----2期内流Ca I-------胞浆Ca浓度l--------心肌收缩I7肾上腺素正性变化肾上腺素与心肌细胞膜上的B1受体结合一一心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性f---------肌浆中Ca浓度增加-------心肌收缩f8乙酰胆碱负性变化乙酰胆碱可直接抑制Ca通道一一Ca内流I一一心肌收缩I0期心室肌细胞兴奋时，膜内电位由静息状态时的-90mV上升到+30mV左右，构成了动作电位的上升支，称为除极过程（0期）它主要由Na+内流形成1期在复极初期，心室肌细胞内电位由+30mV迅速下降到OmV左右，主要由K+外流形成2期1期复极到OmV左右，此时的膜电位下降非常缓慢它主要由Ca2+内流和K+外流共同形成3期此期心室肌细胞膜复极速度加快，膜电位由OmV左右快速下降到-90mV,历时约100150mso主要由K+的外向离子流（Iki和Ik、Ik也称lx）形成4期4期是3期复极完毕，膜电位基本上稳定于静息电位水平，心肌细胞已处于静息状态，故又称静息期Na+、Ca2+、K+的转运主要与Na+—K+泵和Ca2+泵活动有关关于Ca2+的主动转运形式目前多数学者认为Ca2+的逆浓度梯度的外运与Na+顺搜索浓度的内流相耦合进行的，形成Na+-Ca2+交换。