临床检验实验室血液标本分析前处理的重要性

临床检验实验室血液标本分析前处理的重要性在临床实践中，实验室检验结果在帮助医生对疾病的早期检测、诊断、治疗监测及预后中发挥着极其重要的作用，被检样本的质量与检验结果的准确性息息相关对于临床检验室来讲，从检验申请生成到出具检验报告的时间间隔可分为三个阶段分析前、分析中、分析后分析前阶段包含样本的采集、标识、转运、处理、（分杯）直至适于检测以往，临床实验室的质量控制集中于分析中阶段，例如监测分析系统的各项性能指标、批间差异，但据统计60%-80%的实验室差错发生在分析前阶段,其中绝大多数与样本质量有关，因此分析前阶段质量控制特别是样本质量控制具有非常重要的意义血清和血浆是临床检验中使用最普遍的样本类型血清是血液凝固后释放出的不含细胞的淡黄色液体，在凝血过程中，可溶性的纤维蛋白原转变成不溶的纤维蛋白块，所以血清中不含纤维蛋白原；血浆是全血经抗凝处理后，经离心获得的不含细胞成分的液体，血清与血浆在成分上绝大多数物质是相同的，两者之间最大的区别在于血清中不含纤维蛋白原，此外血清中含有一些参与凝血的凝血因子，血浆中含有起抗凝作用的抗凝剂；血清中不含抗凝剂类的外源成分,更为“干净”，抗凝剂可能会干扰某些标志物的检测，故血液中许多成分的分析，都以血清为样本，使用血清的缺点在于凝血过程时间长，促凝剂的应用可使凝血时间缩短至30分钟甚至更短，血浆与血清相比，具有处理和分离速度快的优点，在临床急诊检测中应用较多临床实验室检验采血一般以一次性真空采血管为容器，单支采血管采血量一般为2-10ml；分离血清常用的采血管为无添加剂管、促凝管（含促凝剂）、分离胶管（含促凝剂和分离胶），分离血浆常用的采血管为肝素管、EDTA管等目前真空采血管品类繁多，生产厂家不计其数，各厂家采用的原料、添加剂以及生产工艺的不同可能会导致真空采血管在使用时对临床检验质量的影响，建议临床实验室在使用真空采血管之前进行必要的评估根据所使用采血管的不同，血清样本的获取主要涉及到血液凝集和离心两个阶段，血浆标本的获取仅涉及离心采集血液时，无添加剂的采血管无需反复颠倒,所有含添加剂（枸檬酸钠除外）的采血管均应轻柔地颠倒5-10次以将内容物混匀，以使促凝剂或抗凝剂均匀发生作用，枸椽酸钠采血管颠倒3-4次可将内容物混匀，采血管静置时保持直立就血清制备而言，室温（20-25℃）条件下，血块完全收缩时间一般需要60分钟，促凝剂的使用可使该时间缩短至30分钟以内；对于有明确文献和研究支持确认待测标志物在37℃较为稳定的（例如HBsAg、TSH、T

4、CEA等），可考虑将采血管置于37℃温箱促凝，加速血液析出，不推荐将含有分离胶的采血管置于37℃,因为此温度下分离胶可能会析出对后续检测有干扰的油滴；接受抗凝剂治疗的病人血液凝集时间会延长，样本冷藏（2-8℃）血液凝集时间也会延长血液凝集时间不够，颠倒混匀不恰当，采集管未直立放置会导致血液凝集不充分，离心后肉眼观察血细胞和血清可能分层良好，但凝血过程继续导致的残留纤维蛋白（肉眼不一定可见）可能会导致检测错误,而这种干扰通常是不重复的，一段时间之后随着纤维蛋白的沉积而消失离心阶段主要涉及离心时间和相对离心力（RCF）,依据采血管的材质、离心机的类型、样本的用途选择合适的离心时间和离心力相对离心力与转速（RPM）相比含义更丰富，包含了转速和离心半径，能更有效的说明离心对样本制备的影响相对离心力与转速的计算公式如下RCF=

1.118X10-5XrXn2其中，r为离心半径（cm）,即离心机机头中心到管底的水平距离，n为转速（RPM）,目前临床检验室常用的离心机离心半径一般为15cm左右，本手册附图展示了相对离心力和转速之间的转换关系,并标示出离心半径分别为10cm、15cm,相对离心力分别为1000g和2000g,对应的转速离心时产热不利于分析物稳定，临床实验室应当使用温度控制离心机，一些热不稳定标志物（如ACTH、儿茶酚胺等）应在4c离心分离无特殊温度要求的分析物，离心温度应设定在20℃-22℃,冷藏运送的标本必须在要求的温度下离心下表将血液样本常规处理过程各项参数进行了总结:样颠倒推荐最少凝血时间（分钟）推荐最少离采血管推荐RCFg本次数心时间（分钟）类室温（20-25℃）37℃A型血无添加剂管060301000-200010清促凝管530/1000-200010分离胶促凝管530/1000-200010肝素抗凝管8-10//1500-250010血EDTA抗凝管8-10//1500-250010浆枸椽酸钠抗凝3-4//1500-250010管注释:

1.▲表示有明确文献和研究支持确认待测标志物在37c较为稳定的可选用37℃静置30分钟加速凝血，代替室温静置60分钟[6,7]o

2.推荐的凝血时间以完整结块为依据，对于接受抗凝剂治疗者或其他疾病导致凝血异常的，凝血需要更多的时间

3.使用其他的离心条件（例如更大的RCF和更短的离心时间）也可提供可接受的样本质量，应由实验室进行评估和验证

4.推荐的离心条件基于水平机头离心机而言，对于固定角度机头的离心机离心分离胶管时离心时间建议为15分钟

5.切勿在RCF超过2200的情况下在水平机头离心机上，或在RCF超过1300的情况下在固定角度机头离心机上离心玻璃管，因为玻璃管在以上情况下可能会破裂

[6]o

6.对于一些传染病类敏感项目，初次测定有疑问，需要复测时,进行加强离心，推荐RCF10000g,离心10分钟,注意加强离心前将血清转移至可承受该离心力的离心管中

[8]o

7.样本离心后及时进行检测，如需长期保存，请按相关试剂盒说明要求执行，样本被保存或运输后，推荐在分析前再离心以排除纤维蛋白类的干扰

8.黄疸、脂血、溶血样本一定程度上也会影响实验室检测，此类样本能否用于检测，请参照相关试剂盒说明书

9.使用原始管进行检测前，如发现丝状或絮状物质漂浮在样本中,可使用干净的Tip头将其挑去，重新离心后进行检测。