内镜消毒效果评价方法

内镜消毒效果评价方法1范围本标准规定了用于内镜消毒的消毒剂和清洗消毒机（简称消毒机）的消毒效果的评价原则和试验方法本标准适用于内镜消毒的消毒剂和消毒机消毒效果的评价2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB28232臭氧发生器安全与卫生标准GB28234酸性氧化电位水生成器安全与卫生标准GB/T38502消毒剂实验室杀菌效果检验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件.

3.1内镜一种具有图像传感器、光学镜头、光源照明、机械装置等，可以经口腔进入胃内或经其他天然孔道进入体内的诊疗设备

3.2内镜消毒剂用于内镜消毒并能达到消毒效果的化学制剂注包括商品化的消毒剂与即产即用的消毒剂4缩略语下列缩略语适用于本文件CFU菌落形成单位（ColonyFormingUnit）5评价原则

5.1检测要求

5.

1.1内镜消毒剂的消毒效果鉴定应做实验室试验和模拟现场试验

5.

1.2内镜消毒机的消毒效果鉴定自产消毒剂的，应做实验室试验、模拟现场试验外带消毒剂的，消毒剂应符合我国消毒产品管理的相关规定，应进行实验室试验，试验结果应符合的要求，同时消毒机应做模拟现场试验

5.2评价指标

5.

2.1杀灭微生物指标

5.

2.

1.1实验室试验杀灭微生物指标实验室试验杀灭微生物指标见表1表1实验室试验杀灭微生物指标指示菌株杀灭对数值大肠杆菌

80995.00金黄色葡萄球菌ATCC

65385.00铜绿假单胞菌ATCC

154425.00白色念珠菌ATCC

102314.00龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC

199774.00脊髓灰质炎病毒I型PV-I疫苗株

4.00枯草杆菌黑色变种芽抱ATCC

93725.00不标注杀灭芽抱.可不做枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭试验已做枯草杆菌黑色变种芽抱杀灭试验•可不做其他微生物杀灭试验•除非有特别要求试验均为悬液定量杀菌试验

5.

2.

1.2模拟现场试验杀灭微生物指标模拟现场试验杀灭微生物指标见表2表2模拟现场试验杀灭微生物指标指示菌株杀灭对数值铜绿假单胞菌ATCC15442》

5.00龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC

199774.00枯草杆菌黑色变种芽泡ATCC

93723.00标注杀灭芽抱.应做铜绿假单胞菌和枯草杆菌黑色变种芽抱杀灭试验不标注杀灭芽池•应做铜绿假单胞菌和龟分枝杆菌杀灭试验

5.

2.2酸性氧化电位水和臭氧消毒的消毒效果评价酸性氧化电位水和臭氧用于内镜消毒时，其消毒效果评价应分别按照GB

28234、GB28232的规定

5.3结果判定

5.

3.1消毒剂合格判定标准在消毒剂、消毒机说明书中的最短作用时间、最低作用浓度、最低温度下,实验室试验、模拟现场试验结果均应符合

5.

2.

1.K

5.

2.

1.2的要求；连续使用模拟试验按说明书中的使用方法连续使用最长时间及最多次数后，实验室试验结果应符合

5.

2.L1的要求

5.

3.2消毒机合格判定标准

5.

3.

2.1自产消毒剂的消毒机在消毒剂、消毒机说明书中的最短作用时间、最低作用浓度、最低温度下,实验室试验、模拟现场试验结果均应符合

5.

2.

1.

1、

5.

2.

1.2的要求

5.

3.

2.2外带消毒剂的消毒机在消毒剂、消毒机说明书中的最短作用时间、最低作用浓度、最低温度下,消毒剂应符合我国相关规定，应符合

5.

2.

1.1的要求；消毒机应做模拟现场试验，应符合

5.

2.

1.2的要求连续使用模拟试验按说明书中的使用方法连续使用最长时间及最多次数后，实验室试验结果应符合

5.

2.L1的要求6试验方法

6.1实验室试验

6.

1.1试剂、培养基、器材

6.

1.

1.1实验菌种金黄色葡萄球菌ATCC

6538、龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC

19977、大肠杆菌

8099、铜绿假单胞菌ATCC

15442、枯草杆菌黑色变种ATCC

9372、脊髓灰质炎病毒I型PV-I疫苗株,根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，可增选其他菌株

6.

1.

1.2试验器材

0.3%牛血清白蛋白、中和剂，恒温培养箱、II级生物安全柜等

6.

1.2中和剂鉴定试验按GB/T38502规定进行

6.

1.3定量杀灭试验按GB/T38502规定进行

6.

1.4病毒灭活试验按GB/T38502规定进行

6.2模拟现场试验

6.

2.1试验器材

6.

2.

1.1试验菌株:铜绿假单胞菌ATCC

15442、枯草杆菌黑色变种芽抱ATCC9372和龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC19977；根据特定用途或试验特殊需要,可增选其他菌株

6.

2.

1.2消毒剂、中和剂、稀释液胰蛋白豚生理盐水溶液TPS、

0.3%牛血清白蛋白等

6.

2.

1.3模拟内镜聚四氟乙烯管，外径10mm,内径6mni,总长度2000mm,分别在50mni,1000mm,1950mm处剪断，共分为4截，其内壁能与载体外壁紧密相套连接

6.

2.

1.4载体聚四氟乙烯管外径6mm,内径4m n,长度30m l1经脱脂处理高压l l灭菌后备用

6.

2.

1.5蠕动泵:可调节流速,有单个或多个通道,驱动器转速在lr/min^l00r/mino

6.

2.2试验步骤

6.

2.

2.1染菌载体的制备取

0.02mL芽泡液/菌悬液滴染于聚四氟乙烯管载体内壁，涂抹均匀，置37℃培养箱中干燥30min备用.

6.

2.

2.2染菌模拟内镜的制备试验时，先将模拟内镜体在501nll

1、lOOOmni和1950mni处剪开，取染菌载体分别连接在50mm、1000mm和1950nlm处,将染菌载体分别连接在灭菌后的模拟内镜50mm、lOOOmni和1950mm处，连接处用封口膜密封

6.

2.

2.3清洗消毒程序

6.

2.

2.

3.1浸泡消毒程序将染菌模拟内镜完全浸没在消毒剂中，染菌模拟内镜一端与蠕动泵连接，以

0.1L/min_

0.2L/niin的流速，进行流动浸泡消毒，按消毒剂使用说明书的规定浸泡至作用时间

6.

2.

2.

3.2机械自动清洗程序将模拟内镜体装放于清洗消毒机内规定的位置，按照供应商提供的说明书规定的程序运行

6.

2.

2.4细菌菌落计数消毒处理完毕后，用灭菌镶子将染菌载体取出，分别置于含有10mL中和剂溶液的试管内，敲打200次，分别吸取洗脱液

1.0疝接种平皿，每份样本接种两个平皿阳性对照组，取2个染菌载体，放置室温环境中，不做消毒处理，待试验组处理至最长作用时间，将染菌载体置于含有10mL中和剂溶液的试管中，敲打200次，用稀释液做10倍系列稀释，选适宜稀释度的悬液，分别吸取

1.0疝接种平皿，每份样本接种两个平皿，同时分别吸取试验用中和剂和稀释液各L0mL接种平皿,每份样本接种两个平皿，作为阴性对照组各组接种平皿后，倾注15mL20mLTSA（胰〜蛋白陈大豆琼脂培养基），待凝固后，置37c培养箱内，细菌芽抱培养72h,细菌培养48h,计数菌落数，试验重复3次，计算杀灭对数值

6.

6.3连续使用模拟试验每天将3条模拟内镜浸泡于按产品说明书规定的足够量的消毒液中，取出模拟内镜，洗净晾干，连续浸泡至说明书规定最长时间及最多次数后进行杀灭微生物（选用抵抗力最强的）试验试验按照

6.2进行试验重复3次。