第3章第2节第1课时目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建

第节基因工程的基本操作程序2第课时目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建1对点训练题组一目的基因的筛选与获取（•陕西西安高二调研）基因工程操作“四步曲”的正确顺序是（）

1.2023

①目的基因的筛选与获取

②将目的基因导入受体细胞

③基因表达载体的构建

④目的基因的检测与鉴定

①②③④④①③②A.B.

①③②④③①②④C.D.下列关于技术的叙述，正确的是（）

2.PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上A.PCR该技术需要解旋酶和耐高温的聚合酶B.DNA该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的C.该技术应用半保留复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件D.DNA用扩增下面的片段

3.PCR DNA5/GACCTGTGGAAGC CATACGGGATTG33CTGGACACCTTCG……GTATGCCCTAAC5供选择的引物有

①5’GACCTGTGGAAGC37

②5’CATACGGGATTG37

③5GTATGCCCTAAC37

④5CAATCCCGTATG37共四种，应选择（）

①②②③③④①④A.B.C.D.（•河北邢台高二月考）用技术特异性地拷贝基因”，经四轮循环后产物中有五

4.2023PCR“X种不同的分子下列有关叙述错误的是（）DNA引物1引物2■〜3^——-------P——55——!------n——3X一因,图15375，——--3

①31535,5’3!

③I3----------一!

⑤第一轮循环得到个分子，即

①②各一个A.2DNA第三轮循环得到个分子,其中有个是等长的，也就是有个

⑤C.8DNA22第二轮循环得到个分子，即

①②③④各一个B.4DNA第四轮循环得到个分子，其中有个

⑤D.16DNA4题组二基因表达载体的构建基因工程的核心是构建基因表达载体，下列不属于载体作用的是（）

5.载体能防止目的基因被受体细胞限制酶“切割”A.载体能协助目的基因在受体细胞中复制B.载体含有启动子和终止子协助目的基因表达C.载体具有标记基因，便于筛选含目的基因的受体细胞D.下列关于基因表达载体的说法，不正确的是（）

6.基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤A.基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子、标记基因等

8.终止子位于目的基因的下游，能够终止翻译过程C.不同的目的基因所需的启动子不一定相同D.（•银川高二阶段考）科学家利用质粒（如图）成功构建了蛛丝蛋白基因的重组质粒，并

7.2023在家蚕丝腺细胞中获得大量蛛丝蛋白下列有关说法错误的是（）为防止目的基因自身环化，可以用限制酶和来切割目的基因A.Xha I终止子构建基因表达载体时选用蚕丝蛋白基因的启动子利于基因在家蚕丝腺细胞中表达B.启动子启动子是聚合酶的识别和结合部位，可以驱动遗传信息的转录C.DNA基因表达载体中的标记基因可以用来鉴别与选择含有蛛丝蛋白基因的受体细胞D.标记基箭头所指的位置是限制Hind酶识别和切III割位点（•江苏南通高二期中）如图表示质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,

8.2023pBR322将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选下列有关叙述正确的是（）酶醐酶酶E G人生长激素基因注为氨芾青霉素抗性基因，嶷产为四环素抗性基因Am//可选择的限制酶组合是酶和酶A.E G所选用的受体菌不能含有炉和竟产基因B.4%用含氨茉青霉素的培养基就能筛选出含重组质粒的受体菌C.同时用三种限制酶处理图中质粒，电泳后可得到个条带D.3）综合强化是以提取的为模板，经逆转录获得与之互补的（）序列，再以

9.RT-PCR RNADNA cDNAcDNA序列为模板进行目的片段的扩增，具体过程如图所示下列有关的叙述，正确的是（）RT—PCR过程需要使用耐图温的聚合酶A.1DNA过程中的引物可与互补配对B.2B mRNA游离的脱氧核甘酸只能加到引物的端C.5可用于对病毒的检测与鉴定D.RT—PCR RNA研究人员用如图中质粒和图中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶

10.12切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及鉴定下列叙述不正确的是（）PCR353535,,,,,/.引物甲Ba/nH IHind IIII——I目的基因图2A.构建重组质粒的过程应选用反7i和“就din两种限制酶使用连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组B.DNA能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌C.利用鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙D.PCR•哈尔滨高二期末下列有关的叙述，错误的是

11.2023PCR的原理是半保留复制，解旋和复制不是同时进行的A.PCR DNA的过程主要包括变性一延伸一复性，温度逐渐降低B.PCR技术扩增时，一个分子经过〃轮复制共需引物〃一对C.PCR DNA21常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定的产物聚合酶链式反应是一种用于扩增特定D.PCR

12.PCR DNA片段的分子生物学技术下列关于引物的叙述，不正确的是PCR为保证模板链与引物结合的效率，两种引物之间尽量避免存在互补序列A.为了便于将扩增的片段与载体连接，可在引物的端加上限制酶识别序列B.DNA3,在两种引物上设计加入不同的限制酶识别序列，主要目的是使目的基因定向插入载体并可避C.免目的基因自身环化复性所需的温度、时长和延伸所需的温度、时长均与引物有关D.基因工程中可以通过技术扩增目的基因回答下列问题

13.PCR生物体细胞内的复制开始时，解开双链的酶是在体外利用1DNA DNA o技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板解链为单链的条件是PCR DNAo上述两个解链过程的共同点是破坏了双链分子中的DNAo目前在反应中不使用大肠杆菌聚合酶的主要原因是2PCR DNA⑶含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶，这两种酶对分子有相同的作用序列，DNA但具有不同的催化功能甲基化酶可以对序列进行修饰，使限制酶不能对这一序列进行识DNA别和切割含有某种限制酶的细胞，可以利用限制酶切割外源但不破坏细胞自身的DNA,DNA,其原因可能有

①__________________________________________________________________*________________________________________________________________________________9

②________________________________________________________________________________（）利用扩增目的基因的过程由高温变性（以上）、低温复性（℃左右）、适温4PCR9050延伸（左右）三个步骤构成一个循环,为使得聚合酶能够重复利用，选用的酶应在处理后72℃DNA仍然具备催化活性

14.（2023・江苏镇江高二联考深质粒上有“/I、Hindllk3MHi三种限制酶切割位点，同时还含有四环素抗性基因和氨苇青霉素抗性基因利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如含抗，加din々〃电I盐基|Sal I重组因的DN图所示，请回答下列A问题:1四环素抗性基因赢赢氨镶3转基青酶素抗BamW I因性基因Hind III抗盐烟图1草幼这种新性状（变异性状）的来源属⑴将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状,于苗O⑵如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能，也不能O⑶在构建重组质粒时，应选用两种酶对质粒和含抗盐基因的进行切割，以保证重组DNA DNA序列的唯一性（）如图表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养42方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌互一质粒二=菌落培养基B乙杆菌培养基A⑶培养基A图2培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基和培养基分别还含有A B从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是（填图中的数字）2o菌落中的细菌。