急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统的变化及临床意义

急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统的变更及临床意义急性冠脉综合征患者经皮冠脉介入治疗前后血浆内皮素系统的变更及临床意义［摘要］目的探讨急性冠脉综合征ACS患者经皮冠脉介入治疗PCI前后不同时限血浆内皮素ET水平及外周血单个核细胞ETA及ETB受体表达的变更及其临床意义方法选取2008年10月2009年2月住院并接受PCI治疗的ACS〜患者40例ACS组，包括ST段抬高型心肌梗死STEMI26例STEMI组，非ST段抬高型心肌梗死NSTEMI9例NSTEMI组，不稳定型心绞痛UA5例UA组；选择同期健康体检者20例为比照组采纳酶联免疫法测定比照组及ACS组PCI治疗前后不同时限血浆ET-1水平，同时用半定量RT-PCR方法测定外周血单个核细胞表面ETA及ETB受体的表达结果

①PCI术前1h STEMI组、NSTEMI组、UA组间ET-1水平差异无统计学意义P

0.05,但均高于比照组，差异有高度统计学意义P

0.05；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ET-1水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义P

0.05o

②PCI术前lh STEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETB mRNA表达水平均高于比照组，差异有高度统计学意义P

0.05；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ETA mRNA、ETB mRNA1386-

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3116.收稿日期2013-01-05本文编辑李继翔表达水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义（P

0.05）结论ET系统在PCI术后血管内皮增殖中起着重要作用，可能与再狭窄的发生相关［关键词］急性冠脉综合征；经皮冠脉介入治疗；内皮素［中图分类号］R

541.4［文献标识码］A［文章编号］1673-7210

（2013）06（c）-0060-04经皮冠脉介入治疗（PCI）术是目前治疗冠心病的主要策略之一，但植入支架术后仍有20%30%的〜再狭窄率很多探讨发觉介入治疗术后再狭窄是一个内皮功能失调的过程在球囊扩张及支架植入过程中，存在不同程度的支架植入部位内皮的剥脱、损伤和功能紊乱，随之引发中层平滑肌细胞增殖、迁移和表型的变更是PCI术后再狭窄的主要缘由之一内皮素T（ET-1）是剧烈的缩血管因子，同时具有强有力的促平滑肌细胞分裂作用，其效应是通过与ETA和ETB受体的结合而介导因此ET系统可能在再狭窄的发生中起着重要作用探讨证明人外周血单个核细胞具有产生ET-1的实力，且在单个核细胞表面有ETA受体（ETA-R）及ETB受体（ETB-R）的表达［1］0本探讨应用逆转录聚合酶链反应半定量法，测定了急性冠脉综合征（ACS）患者PCI术前及术后不同阶段血浆ET-1水平及外周血单核细胞表面ETA及ETB受体表达的变更，进而探讨ET系统在PCI术后血管内皮增殖中以及再狭窄的临床意义1资料与方法

1.1一般资料选取2008年10月2009年2月住院并接受PCI治疗的ACS患者40例ACS组，包括〜ST段抬高型心肌梗死STEMI26例STEMI组，非ST段抬高型心肌梗死NSTEMI9例NSTEMI组，不稳定型心绞痛UA5例UA组；其中男22例，女8例；选择同期健康体检者20例为比照组，全部入选对象需解除患有严峻肺实质疾病、自身免疫系统疾病、自身免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液系统疾病、急性或慢性感染性疾病、急性脑梗死1个月内的患者全部入选者均签署知情同意书各组一般资料比较，差异均无统计学意义P

0.05,具有可比性

1.2方法

1.

2.1ET-1的测定ET-1酶联免疫分析试剂盒由北京东亚免疫技术探讨所供应

1.

2.2外周血单个核细胞采集全部患者随机采集PCI术前1h及术后12h、24h及术后7d、术后3个月静脉血5mL用乙二胺四乙酸EDTA抗凝，静置2h后分别血浆，以3000r/min离心5min,吸取白细胞层，用生理盐水稀释后，缓慢加入5mL淋巴细胞分别液，以3000r/min离心25min,吸取单个核细胞层至EP管，离心4min,弃上清，加入1mL红细胞RBC裂解液离心4min,弃上清，然后加入200L RNAfree水溶解沉淀

1.

2.3总RNA提取取50L单个核细胞溶液按硫氧酸胭-酚一氯仿法抽提总RNA,置入-70℃冰箱保存

1.

2.4一步法半定量RT-PCR操作参照TaKaRa大连宝生物公司一步法RT-PCR试剂盒说明书进行引物由上海生物工程公司合成ETA引物序列上游5-CACTGGTTGGATGTGTAATC-3；下游5-GATACACCAGTAACTAGAGGC-3,367bp；ETB引物序列上游5-TCAACACGGTTGTGTCCTGC-3；下游5-TTCTAACCACCGACAAGTCA-3,,529bp；-actin引物序列上游5-TGTGCTACGTCGCCCTGGACTTGG-3；下游5-GAGGTAGGACCGGAGCGACAGGTG-3,263bp取扩增产物上样4L,用

1.5%的琼脂糖凝胶电泳，用SynGene公司成像系统进行成像所得条带用scion immage软件进行灰度值的半定量

1.3统计学方法采纳统计软件SPSS

16.0对数据进行分析，正态分布的计量资料以均数标准差XS表示，多组间比较采纳方差分析，两两比较采纳LSD-t检验计数资料以率表示，采纳2检验以P

0.05为差异有统计学意义2结果

2.1各组PCI治疗前后ET-1水平变更PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组间ET-1水平差异无统计学意义P

0.05,但均高于比照组，差异有高度统计学意义P

0.05；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ET-1水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义P

0.05见表

12.2各组PCI治疗前后ETAmRNA的表达状况PCI术前1hSTEMI组、NSTEMI组、UA组ETAmRNA、ETBmRNA表达水平均高于比照组，差异有高度统计学意义P

0.05；术后3个月STEMI组、NSTEMI组、UA组ETA mRNA、ETB mRNA表达水平均低于同组术后7d水平，差异有统计学意义P

0.05o见表

2、3O3探讨ET是内皮细胞分泌的血管活性肽，是迄今已知作用最强的缩血管物质，并有促进细胞增殖的作用，ET通过与ET受体的结合发挥其生物学作用，在哺乳动物仅发觉有ETA和ETB两种受体ET可引起各种血管收缩，以冠脉最为敏感［2］已发觉在包括冠心病在内的多种心血管疾病中ET水平的上升［3］大多数探讨认为，ET在急性心肌梗死AMI早期上升，发病数小时达高峰，以后渐渐下降，并且其水平与有无并发症、心功能状态明显相关Stewart等［4］报道，ET在无并发症的AMI后6h达高峰，24h内降到比照水平，而有低血压、心力衰竭或反复心肌缺血者ET上升更明显，在

48、72h仍高于比照Yip等［5］报道在接受PCI治疗AMI患者中ET-1的上升可能与差的预后相关本探讨结果显示，ET水平在ACS患者中术前基础水平即高于比照组这与已有的大多数探讨结果一样，提示ET局部分泌在ACS发病中的重要性而在PCI术后24h内，ET-1水平出现时间依靠性的上升，在24h达高峰，并在1周内维持在此高水平，以后渐渐下降，在3个月左右降到术前水平，提示由于球囊扩张与支架植入造成的内皮急性损伤作为剧烈的刺激因素，促使内皮细胞急剧活化，促使血管平滑肌细胞释放大量ET-1入血，而ET-1功能活性通过ETA和ETB受体介导，作用于血管平滑肌细胞，致有丝分裂，从而导致新生内膜形成和血管堵塞人类冠状动脉壁ET-1的产生，可以刺激平滑肌细胞的增殖和迁移，这有助于在PCI损伤部位形成ET-1富集的平滑肌细胞的新生内膜组织从而形成了再狭窄的初始基础另外，这可能与PCI术后无复流，急性支架内血栓形成易在24h内发生等PCI术后严峻并发症的发生亲密相关，并与ACS患者PCI术后长期预后相关［6-7］Wang等［8］发觉，大鼠颈动脉球囊成形术后ET-K ECE、ETAmRNA和ETBmRNA存在时间依靠性上升在本探讨中视察到，在PCI术前6h内ETA mRNA和ETB mRNA表达即高于比照组，术后出现时间依靠性的上升，并在24h左右达到高峰，1周内持续维持在一个高水平状态，3个月后出现逐渐减弱，呈现与ET-1分泌水平基本相一样的动态变更因此，此结果支持这一假说，即ECE/ECE/ET-R系统在人类血管新生内膜的形成中起重要作用此外，本探讨还显示，外周血单个核细胞表面ETA mRNA的表达强于ETB mRNA,提示外周血单个核细胞表面可能以ETA受体为主综上所述，ET系统在PCI术后再狭窄的发生中起着重要作用，在理论上，阻断ET系统可能会对PCI术后再狭窄的发生起到抑制作用，在一项接受PCI治疗的STEMI患者中运用ETAR阻断剂BQ-123的探讨显示出组织水平的灌流改善和左室射血分数的提高［9］在一些模拟AMI的动物试验中运用选择性的ET-1受体拮抗剂显示出微小冠脉血流和左室重构的改善以及病死率的下降[10-12]o但ET具有多重作用，介导和参加多种心血管疾病的发生，迄今没有发觉一种疾病是由于单纯ET异样所致，因此，运用ET受体拮抗剂阻断ET系统，能否阻断或逆转PCI术后再狭窄尚需更多更深化的探讨[参考文献]

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