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血液学一般检验高频考点汇总必背
一、血液生理概要
1、血液由血细胞和血浆组成,血细胞包括红细胞、白细胞和血小板其中血浆占血液的55%,血细胞占45%
2、血液在加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆血液离体后自然凝固,分离出来的液体称为血清由于血液在凝血过程中会消耗某些凝血因子,如凝血因子I纤维蛋白原、n凝血酶原、V、训!等,故血清中不含这些凝血因子,这是与血浆的主要区别
3、血液的主要生理功能有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定、防御功能
4、血液的主要理化性质1血量正常人的血液总量约为70±10ml/Kg体重,成人为45升,占体重的6%8%〜〜2颜色动脉血因氧合血红蛋白Hb0含量高而呈鲜红色,静脉2血因还原血红蛋白Hbred含量高而呈暗红色严重CO中毒呈樱红色3红细胞的悬浮稳定性是由于红细胞表面的唾液酸带负电荷4黏滞性黏度主要与HCT和血浆黏度有关血浆黏度主要与血浆中的纤维蛋白、球蛋白有关,它们浓度越高,血黏度越中性分叶核粒细胞507027〜〜嗜酸性粒细胞
0.
550.
020.5〜〜嗜碱性粒细胞0-10-
0.1淋巴细胞
20400.84〜〜单核细胞
380.
120.8〜〜
8、血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系血涂片上WBC数血涂片上WBC数WBC X107L WBCX109/L/HP/HP24476101012〜〜〜〜467-9101213-18〜〜
9、临床意义中性粒细胞生理性增多(边缘池的白细胞过渡到循环池导致)
①下午较上午高;
②运动、激动、冷刺激、暴热会高;
③新生儿、妊娠妇女高中性粒细胞病理性增多
①感染;
②出血;
③组织损伤;
④中毒;
⑤白血病和恶性肿瘤类白血病指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应外周血白细胞增高,并可有数量不等的幼稚细胞出现,红细胞和血小板一般无变化,骨髓增生很少达到白血病程度!常见的引起类白血病的因素是感染和肿瘤,其次是急性中毒、外伤、休克、急性溶血或出血、大面积烧伤及过敏等中性粒细胞病理性减少
①某些革兰阴性杆菌伤寒、副伤寒杆菌及病毒流感感染;
②再障、非白血病性白血病;
③慢性理化损伤;
④自身免疫疾病,如SLE;
⑤脾功能亢进;粒细胞减少症指成人外周血白细胞计数持续<
3.5X107L,,血中性粒细胞绝对值V
1.5X107L粒细胞缺乏症指成人外周血白细胞计数持续V2X107L,,血中性粒细胞绝对值VO.5X109/LO长期使用肾上腺皮质激素、伤寒会导致嗜酸性粒细胞减少五白细胞形态检查
1、正常白细胞形态1中性粒细胞形态要点直径1015um,瑞氏染色细胞质呈粉红〜色,胞质内有染成淡粉色的中性颗粒细胞核分25叶〜2嗜酸性粒细胞形态要点直径1315um,瑞氏染色可见胞质内〜充满粗大、整齐、均匀、紧密罗列且折光性强的橘红色嗜酸颗粒,细胞核多分为2叶,呈眼镜状3嗜碱性粒细胞形态要点直径10-12um,瑞氏染色可见胞质内含有粗大但大小不
一、分布不均的紫黑色嗜碱性颗粒,颗粒常盖于细胞核上4淋巴细胞形态要点大淋巴直径1015um,小淋巴直径6-lOum,〜瑞氏染色可见胞质呈透明天蓝色,细胞核圆形,常偏于一侧,染色质粗糙紧密,排列均匀无空隙5单核细胞形态要点直径1420um,瑞氏染色可见胞质丰富,〜染淡灰色或者淡粉红色,细胞核不规则,可呈肾形、马蹄形、S型,常扭曲折叠,染色质细致疏松如网状
2、异常白细胞形态1中性粒细胞中毒颗粒中性粒胞质中出现的粗大、大小不等、分布不均的紫黑色或深紫红色颗粒,常见于严重化脓性感染及大面积烧伤等含中毒颗粒的细胞在中性粒细胞中所占的比值称为毒性指数根据毒性指数的不同,中毒程度分为毒性指数为1时是极重度
0.75为重度,
0.5为中度,
0.25为轻度2空泡细胞受损后发生脂肪变性的结果,最常见于严重感染特别是败血症3杜勒小体Dohle中性粒细胞细胞质毒性变化而保留的局部嗜碱性区域,P0X染色阳性呈圆形、梨形或云雾状是核浆发育不平衡的表现4核左移外周血中杆状核粒细胞增多并出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒的现象常见于急性化脓性感染,急性中毒等再生性核左移核左移伴WBC升高表示骨髓造血功能旺盛,退行性核左移核左移伴WBC降低表示骨髓造血功能底下杆状核粒细胞>6%,称轻度左移杆状核粒细胞>10%并伴有少数晚幼粒细胞者为中度核左移杆状核粒细胞>25%并出现更幼稚的粒细胞时,为重度核左移,常见于粒细胞性白血病或中性粒细胞型白血病样反应
(5)核右移外周血中5叶核以上的中性粒>3%,核右移常伴随WBC总数减少,属造血功能衰退的表现巨幼细胞性贫血时可出现核右移如患病期出现核右移是预后不良的表现
(6)淋巴细胞的异常形态称异型淋巴细胞,分为I型(空泡型)亦称浆细胞型、n型(不规则型)亦称单核细胞型和in型(幼稚型)增多见于传染性单核细胞增多症
(六)血小板检查
1、血小板有骨髓中成熟的巨核细胞脱落而来,在外周血中的寿命为7-14天
2、血小板计数临床常用血细胞分析依法,ICSH推荐的参考方法是PLT/RBC比值法参考区间为(100-300)X107LPLT低,MPV增高,提示说明骨髓增生正常,但外周血小板破坏增多
3、正常血小板直方图,在230fl范围内分布〜
(七)网织红细胞计数
1、网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞胞质内残存部分嗜碱性物质,可被新亚甲蓝、煌焦油蓝等染料活体染色呈网状或颗粒状结构而得名,染液与血液的比例l lo
2、网织红细胞根据形态特征和成熟程度分为4型I型(丝球型)、n型(网型)、in型(破网型)、w型(点粒型),正常人外周血可见ni型和w型,以w型为主
3、网织红细胞试管法染色时间为1520分钟,一般染15分钟〜
4、计数公式
①常规法1000个红细胞中的网织红细胞数/1000X100%
②Miller窥盘计数公式大方格B内的网织红细胞数/(小方格A内的红细胞数X9)X100%
5、网织红细胞参考区间
①相对值成人和儿童
0.5%
1.5%;新生儿3%6%〜〜
②绝对值
(2484)X109/L〜
6、临床意义
①网织红细胞相对值低于
0.5%,绝对值是低于15X107L是诊断再障的标准之一
②网织红细胞生成指数RPI,正常人为1,3提示溶血性贫血或急性失血性贫血1提示骨髓增生低下,如再障
③缺铁型贫血和巨幼性贫血在用药35天网织红细胞开始上升,7〜10天达到峰值,2周左右开始下降网织红细胞是判断缺铁性贫血铁〜剂治疗有效的最快速指标
7、仪器计数网织红细胞根据胞质内荧光强度的不同,分为低荧光强度网织红细胞(LFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、高荧光强度网织红细胞(HFR),外周血主要为LFR网织红细胞成熟指数(RMI)二(MFRHFR)/LFR网织红细胞生成指数(RPI)二网织红细胞比值X患者HCT/正常人HCT
(八)血细胞比容测定
1、血细胞比容是将定量的抗凝血液在一定的速度(3000r/min,离心力2264g)和时间(30min)离心沉淀后,观察压实红细胞(还原层红细胞)所占全血的百分比
2、离心后的血液分为5层,从上到下依次是血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层(紫黑色)及带氧红细胞层
3、WHO推荐的测定HCT的方法是微量法,常用方法是血细胞分析依法,参考方法是放射性核素法
4、温氏法和微量法都无法排除细胞间的残留血浆,当红细胞形态异常时候,可使残留血浆增加
5、参考区间男
0.380-
0.508女
0.335-
0.
4506、HCT增高见于各种原因引起的血液浓缩,如出汗、呕吐、腹泻、烧伤等,红细胞增多症、新生儿
(九)红细胞平均值计算
1、MCV(平均红细胞体积)=HCT/RBCMCH(平均红细胞血红蛋白含量)=Hb/RBCMCHC(平均红细胞血红蛋白浓度)=Hb/HCT
2、MCV,MCH,MCHC三者的关系是MCHC=MCH/MCV,含量除以体积等于浓度
3、MCV单位是fl,lfl=1015L MCH的单位是pg,lpg=10-12gOo
4、参考区间MCH26-34pgMCV80-100flMVHC320-360g/L贫血形态学分类形态学分类MCV MCHMCHC正细胞性贫血正常正常正常注红细胞凝集会导致MCV假大细胞性贫血增高增高正常性增高单纯小细胞性贫高脂血症会导致MCH假性增降低降低正常血高小细胞低色素性降低降低降低贫血
5、嗜酸性粒细胞计数的稀释液中成分的主要左右有3种
①嗜酸性粒细胞保护剂(如丙酮、乙醇、丙二醇);
②促进红细胞和中性粒细胞破坏(如碳酸钾、草酸镂或低渗状态);
③使嗜酸性粒细胞着色(如伊红、滨甲酚紫、石楠红)等(+)红细胞沉降率测定
1、血沉是红细胞在一定条件下的沉降速度
2、血沉过程可分为三期,第一期为红细胞缗钱状形成期,第二期为快速沉降期,第三期为红细胞堆积期
3、影响血沉快慢的因素主要有血浆因素和红细胞因素纤维蛋白增加时,血沉加快,清蛋白增加时,血沉减慢红细胞增多时,血沉减慢,反之加快红细胞形态异常(如镰刀形、球形)时血沉减慢
4、血沉测定参考方法是魏氏法
5、参考区间男0-15mm/h女0-20mm/ho
6、临床意义血沉增快
①各种炎症;
②组织损伤坏死,心肌梗死血沉加快,心绞痛血沉正常,可作为两者的一个鉴别参考;
③恶性肿瘤;
④高球蛋白血症,如SLE、MM RF等
⑤贫血;
⑥高胆固醇血症
(十一)血细胞分析仪及直方图
1、血液分析仪采用电阻抗原理,脉冲信号的大小与细胞体积成正比,脉冲频率的多少与细胞数量成正比
2、白细胞五分类检测VCS原理中的V是细胞体积,C是细胞内部结构电导性,S是光散射
3、白血病标本时,三分群白细胞分析仪白细胞直方图上易出现小细胞区正常,中间细胞区与大细胞区融合增加
4、红细胞分布宽度(RDW)是反应红细胞体积异质性的参数,正常人〈15%在不均一性贫血时,RDW增高
5、白细胞直方图淋巴细胞前面出现峰考虑巨血小板和血小板凝集
6、红细胞出现双峰是铁粒幼细胞贫血或者缺铁性贫血恢复
7、缺铁性贫血红细胞直方图峰波峰左移,底部变宽巨幼细胞性贫血红细胞直方图波峰右移,底部变宽红细胞直方图体积区域大多设定在25250fl或36300fl〜〜
8、白细胞直方图异常变化的常见原因白细胞直方图变化主要原因有核红细胞、血小板聚集、巨大血小板、淋巴细胞峰左侧异常未溶解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异形淋巴细胞淋巴细胞峰右移,与单急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血个核细胞峰左侧相连并病、异形淋巴细胞原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞单个核细胞峰抬高增宽增多、嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多单个核细胞峰与中未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜性粒细胞峰之间异常酸性粒细胞增多中性粒细胞峰右移、抬中性粒细胞绝对值增多高、增宽
9、MCV与RDW分类贫血MCV RDW贫血类型常见病因和疾病减少正常小细胞均一性地中海贫血(轻型)减少增高小细胞不均一,性缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血贫血正常正常正细胞均一性再生障碍性贫血、急性失血混合型营养性缺乏性贫血、铁粒正常增高正细胞不均一性幼细胞贫血骨髓增生异常综合征、部分再生增大正常大细胞均一性障碍性贫血、增高增高大细胞不均一性巨幼细胞贫血、某些肝病性贫血高健康成人全血黏度为生理盐水的45倍,血浆黏度为生理盐水的〜
1.6倍左右5比密血液比密男性为
1.
0551.063,女性为
1.051〜〜
1.060;血浆比密为
1.
0251.030,血细胞为
1.090〜6渗透压血浆的渗透压主要为晶体渗透压,与血浆中的晶体物质有关,特别是电解质正常人血浆渗透压为290310m0sm〜kg•H0O27pH正常人血浆pH为
7.
357.45〜
二、血液标本的采集、送检、保存与处理
1、采血的方法和部位皮肤采血一人一针,WHO推荐成人使用左手无名指内侧婴幼儿选用足跟;静脉采血成人选用肘部静脉压脉带不捆绑不超过1分钟真空采血法是ICSH推荐的采血方法,也是临床常用的采血方法手工法做血常规时,采血的顺序依次为血小板、红细胞、血红蛋白、白细胞、血型鉴定
2、普通采血注意事项为了避免溶血应注意
①注射器和容器必须干燥;
②抽血时避免气泡产生;
③抽血完毕后拔下针头再把血沿管壁注入容器;
④禁止用力震荡试管;
⑤血小板功能试验应使用塑料注射器或经硅化处理后的试管;
⑥压脉带捆绑不能超过1分钟
3、溶血对K的影响最大,对酶类影响也大,尤其是LDH
4、血液标本若不能及时检查,血液应室温保存虽然4℃可延长血液贮存,但会影响PLT和MPV值
5、血液标本的抗凝
①血细胞计数用EDTA-L不适凝血和血小板功能检查抗凝,紫盖;
②红细胞渗透脆性试验、HCT用肝素不适凝血检查和白细胞计数抗凝,绿盖;
③凝血因子测定用枸椽酸钠抗凝,比例是1:9,蓝盖
④血沉测定用枸檬酸钠抗凝,比例是1:4,黑盖
⑤血糖测定用氟化钠抗凝,灰盖;
⑥血钙用肝素抗凝
⑦双草酸盐抗凝剂由草酸钾和草酸镂按照2:3比例配合而成,前者可使红细胞体积变小,后者反之
6、血涂片的制备
①一张良好的血涂片应厚薄适宜、头体尾分明、细胞分布均匀、边缘整齐、两侧有一定空隙、血膜占玻片的2/3;
②HCT增高,应使用小血滴、小角度、慢推HCT低时,反之
三、血细胞染色
1、瑞氏染色Wright是血涂片最常用的染色方法1瑞氏染液由碱性亚甲蓝,酸性伊红,甲醇有机溶剂、脱水、固定组成;2细胞的着色既有物理吸附作用又有化学亲和作用;3碱性环境中细胞带负电,与碱性染料亚甲蓝结合偏蓝酸性性环境中细胞带正电,与酸性染料伊红结合偏红,中性颗粒与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色;4缓冲液的pH为
6.
46.8,如果缓冲液偏酸pH
6.4则红细〜胞和嗜酸性粒细胞偏红,白细胞核呈淡蓝色或不着色如果缓冲液偏碱pH
6.8细胞染呈灰蓝色,颗粒深暗;嗜酸性粒细胞可染成暗褐色,甚至紫黑色或蓝色;中性颗粒偏粗,染成紫黑色5新鲜配置的染液染色效果差,应贮存一段时间,时间越久,染色效果越好,瑞氏染液的成熟指数以RA A650rlm/A525nll1=
1.3±
0.1为宜
2、吉姆萨染色Giemsa1吉姆萨染液组成天青,伊红,甲醇,纯甘油2染色原理和瑞氏染色原理一样,本法对细胞核和寄生虫着色较好,但对细胞质和颗粒着色较差3瑞氏-吉姆萨复合染色法能使细胞核及细胞颗粒均能获得满意的染色效果
四、血液常用检查
1、血细胞显微镜计数的误差有技术误差和固有误差,其中技术误差包括
①采血部位不当;
②稀释倍数不准;
③充液不当;
④血液发生凝固;
⑤误认;
⑥仪器不准;
⑦气泡产生固有误差包括计数域误差和仪器误差,比如每次充池后细胞计数池分布不可能完全相同而造成的误差仪器误差指仪器不精密而造成的误差一红细胞计数
1、造血干细胞分化发育到网织红细胞需要3天,网织红细胞到成熟红细胞需要2天
2、红细胞在外周血的平均寿命为120天
3、显微镜计数红细胞常用的稀释液有
①Hayem稀释液由NaCl、Na2s0八HgCl和蒸储水组成其中NaCl和Na2so4调节渗透压,后者还可提高比密防止细胞粘连,而HgCl为防腐剂
②枸椽酸钠稀释液由NaCl、枸椽酸钠、甲醛及蒸偏水组成NaCl和枸檬酸钠调节渗透压,后者还有抗凝作用,甲醛为防腐剂
4、牛鲍计数板计数RBC计数公式/L=N(五个中方格的RBC数)X5X10(
0.lul变为lul)X200(稀释倍数)X106(lul换成成IL)=NX1010=N/100X1012O牛鲍计数板每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高
0.lOimn的计数池计数池画有长、宽各
3.0mm的方格,分为9个大方格,每个大格面积为
1.0毫米XI.0毫米=
1.0平方毫米;容积为
1.0平方毫米X
0.1毫米=
0.1立方毫米其中,中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,每个中方格用单线划分为16个小方格四角的4个大方格是白细胞计数区域,每个大方格用单线划分为16个中方格
5、新生儿红细胞参考值6〜7X10%/成男
4.0〜
5.5XL1012/Lo成女
3.5-
5.0X1012/L新生儿红细胞高于成年人的原O因是生理性缺氧造成的
6、末梢血比静脉血测定结果高10%-15%
07、发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例大细胞性贫血血红蛋白浓度相对偏高,也就是说巨幼贫的时候红细胞的降低幅度的大于Hb的,Hb也可能正常,小细胞低色素贫血的血红蛋白减低,但红细胞计数可正常
(二)血红蛋白测定
1、血红蛋白由珠蛋白和亚铁血红素组成每个血红蛋白有4条珠蛋白肽链,每条肽链包裹一个亚铁血红素
2、正常人的血红蛋白主要为HbA,占90%以上,珠蛋白肽链组成为a262,含a262珠蛋白肽链的HbA2占2%-3%,含2丫2珠蛋白肽链的HbF占2%一下新生儿和婴儿的HbF含量显著高于成人,约占Hb总量的70%左右
3、ICSH和WHO推荐的测定血红蛋白的方法是氧化高铁血红蛋白测定法(HiCN)0最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm本方法的致命缺点是氟化钾有剧毒
4、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法(SDS)是血红蛋白测定的次选方法,波峰在538nni,波谷500mn但是其的摩尔消光系数未确认
5、血红蛋白参考值:男性120160g/L,女性H0~150g/L,新生〜儿170200g/L〜
6、根据血红蛋白浓度,成人贫血程度分为4级
①轻度Hb低于参考值下限,但90g/L;
②中度Hb61-90g/L;
③重度Hb30-60g/L;
④极重度Hb30g/Lo
(三)红细胞形态检查
1、正常红细胞直径参考值
6.
77.7um,平均
7.2um〜
2、小红细胞直径V6um,大红细胞直径10uni,巨红细胞直径15umo
3、球形红细胞是由于红细胞酶缺陷所致,无中心淡染区,常见于遗传性球形红细胞增多症
4、椭圆形红细胞是由于红细胞膜缺陷所致,正常人约占1%,巨幼细胞性贫血可高达15%;超过15%对遗传性椭圆形红细胞增多症有诊断价值
5、靶形红细胞见于珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血)
6、镰形红细胞由于红细胞内存在异常Hb(HbS)所致
7、口形红细胞在遗传性口形红细胞增多症时常达10%以上DIC和酒精中毒可见少量此类细胞
8、棘形红细胞见于遗传性6脂蛋白缺乏症
9、泪滴样红细胞见于骨髓纤维化
10、染色质小体又叫豪焦小体(H-J),是位于成熟或幼稚红细胞细胞质中的紫红色小体,已证实为核的残余物
11、卡-波环呈紫红色圈状或“8”字形,可能是纺锤体残余物或脂蛋白变性所致
12、碱性点彩红细胞为铅中毒的筛查指标
13、嗜多色性红细胞增多是骨髓造血功能旺盛的表现
(四)白细胞计数
1、人体外周血中的白细胞包括中性粒细胞(N){又包括杆状核(Nst)和分叶核(Nsg)}、嗜酸性粒细胞(E)、嗜碱性粒细胞(B)、淋巴细胞(L)和单核细胞(M)五种形态杆状核和分叶核的比例是1:
132、白细胞分化过程原始粒细胞f早幼粒细胞f中幼粒细胞一晚幼粒细胞(丧失分裂能力)一杆状核粒细胞分叶核粒细胞
3、白细胞分为分裂池(原、早、中幼粒细细胞)、成熟池(晚幼、杆状核粒细胞,丧失分裂能力)、贮存池(分叶核及部分杆状核)、循环池(血液循环流动的粒细胞)、边缘池(微静脉和毛细血管壁的粒细胞,和循环池保持动态平衡)五个池白细胞计数的是循环池,不包括边缘池
4、白细胞分类计数的参考方法是手工目视显微镜计数,油镜下分类计数200个白细胞常用方法是血液分析仪法人在出生后有两次淋巴细胞和中性粒细胞相等的时间分别是45岁,69天〜〜
5、牛鲍计数板计数WBC计数公式/L=N(四个大方格的WBC数)/4X10(
0.lul变为lul)X20(稀释倍数)XI(iul换成成IL)=N/20X109O嗜酸性粒细胞计数是计数两侧计数池的10个大方格公式N/10X10(
0.lul变为lul)X20(稀释倍数)Xl(r(iul换成成IL)=NX20X106=
0.02NX109O白细胞校正公式校正后的白细胞数/L=100/(100有核红细胞数)X校正前的白细胞数
6、白细胞三分类血液分析仪使用电阻抗法根据白细胞体积大小分为三群,第一群为小细胞区,体积在3590fl,主要为淋巴细胞;第二〜群为中间细胞区,体积在90160fl,一般包括单核细胞、嗜酸性粒细〜胞;嗜碱性粒细胞等,在病理情况下还包括原始细胞、幼稚细胞、异型淋巴细胞等;第三群为大细胞区,体积在160fl以上,主要为中性粒细胞
7、参考区间成人4-10X107L儿童512X107L〜6个月2岁ll-12X109/L〜新生儿1520X107L〜白细胞分类计数参考区间白细胞百分率(%)绝对值中性杆状核粒细胞
150.
040.5〜〜。