文本内容:
食品中脂肪含量测定-酸水解法食品中脂肪含量测定-酸水解法
一、实验目的本实验旨在通过酸水解法测定食品中的脂肪含量,了解该方法的基本原理、操作步骤和注意事项,提高实验操作技能和准确度
二、实验原理酸水解法是一种测定食品中脂肪含量的常用方法该方法主要基于食品中的脂肪在酸性条件下可被水解成游离脂肪酸,然后通过比色法或滴定法测定游离脂肪酸的含量,从而推算出样品中脂肪的含量本实验采用比色法进行测定,具体操作步骤如下
1.样品处理称取适量样品,用滤纸包裹,放入烘箱中烘干,然后用研钵研磨成粉末
2.酸水解将样品粉末放入三角瓶中,加入适量酸溶液,置于水浴中加热一定时间,使脂肪水解成游离脂肪酸
3.萃取取出三角瓶,加入适量有机溶剂,震荡萃取游离脂肪酸
4.比色测定将萃取后的有机相用比色法测定游离脂肪酸的含量
三、实验步骤
1.样品处理称取
5.0g样品,用滤纸包裹,放入烘箱中烘干至恒重,然后用研钵研磨成粉末,备用
2.酸水解将样品粉末放入250mL三角瓶中,加入10mL盐酸盐酸和10mL无水乙醇,轻轻震荡使样品与酸充分接触将三角瓶置于85c恒温水浴中加热30分钟,使脂肪水解成游离脂肪酸
3.萃取取出三角瓶,加入100mL乙醛,震荡萃取游离脂肪酸将乙醛层倒入干燥的三角瓶中,重复萃取一次,以充分提取游离脂肪酸
4.比色测定将萃取后的有机相用比色法测定游离脂肪酸的含量具体操作如下
(1)标准曲线制作分别吸取
0、
0.
2、
0.
4、
0.
6、
0.
8、
1.0mL的胆固醇标准液于6支试管中,补加无水乙醇至1mL,然后加入5mL的硫酸溶液和2滴二硝基苯甲酸溶液充分震荡后放置10分钟,用比色法测定各试管中溶液的吸光度以吸光度为纵坐标,胆固醇含量为横坐标绘制标准曲线
(2)样品测定从萃取后的有机相中取1mL无水乙醇溶液于试管中,加入5mL的硫酸溶液和2滴二硝基苯甲酸溶液充分震荡后放置10分钟,用比色法测定吸光度根据标准曲线计算游离脂肪酸的含量
(3)结果计算根据测定的游离脂肪酸含量和样品质量,计算样品中脂肪的含量计算公式如下脂肪含量噩)=(游离脂肪酸含量/样品质量)X100
四、注意事项
1.在使用烘箱烘干样品时,要保证烘箱温度恒定且不高于规定温度,以防样品氧化变质
2.在进行酸水解时,要保证水解温度和时间的准确性,以确保脂肪充分水解成游离脂肪酸
3.在使用比色法测定游离脂肪酸含量时,要保证标准曲线制作的准确性,以提高实验结果的准确性。