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BJH化妆品补充检验方法BJH202302化妆品中氯倍他索乙酸酯的测定2023-10-30发布国家药品监督管理局化妆品中氯倍他索乙酸酯的测定BJH2023021范围本方法规定了化妆品中氯倍他索乙酸酯的测定方法本方法适用于液体(水、油)类、膏霜乳类、凝胶类、泥类和贴膜类化妆品中氯倍他索乙酸酯的定性和定量测定2原理样品以乙懵为溶剂提取,采用高效液相色谱仪分离,质谱检测器检测根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性,定量离子对峰面积定量,以标准曲线法计算含量3试剂和材料除另有规定外,本方法中所用试剂均为分析纯及以上规格,水为符合GB/T6682规定的一级水
3.1乙月青,色谱纯
3.2正己烷,色谱纯
3.370%乙月青溶液取乙晴(
3.1)、水按体积比7:3混合,摇匀
3.4标准品氯倍他索乙酸酯的标准品,纯度298%标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式详见附录A中的表A.
13.5氯倍他索乙酸酯标准储备溶液称取氯倍他索乙酸酯标准品lOmg(精确到
0.0001g),置于10mL容量瓶中,用乙情(
3.1)溶解并定容至刻度,摇匀制成标准储备溶液的质量浓度为1000mg/Lo置于-20C冰箱中保存,有效期1个月
3.6氯倍他索乙酸酯标准溶液准确移取氯倍他索乙酸酯标准储备溶液(
3.5)适量,用乙腊(
3.1)配制得质量浓度为10mg/L的氯倍他索乙酸酯标准溶液置于-20C冰箱中保存4仪器和设备
3.7高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪
3.8分析天平感量
0.0001g和
0.00001g
3.9超声波清洗器
3.10旋混合仪
4.5离心机
5.样制备与保存样品应按照标签标示的贮存条件进行保存取样前,应检查封口的完整性,观察样品的性状和特征,并使样品混匀打开包装后,应尽可能快地取出所要测定部分进行分析,取样后,应将样品进行密封保存
6.析步骤
6.1筛查用标准溶液取氯倍他索乙酸酯标准溶液(
3.6)适量,用乙月青(
3.1)进行稀释,配制成浓度为5ug/L的筛查用标准溶液
6.2空白基质提取液称取空白试样
0.2g(精确到
0.001g),置于10mL具塞比色管中,自“加入少量乙睛(
3.1)”或“加入2niL正己烷(
3.2)”起与样品同法处理(
6.5),作为空白基质提取液
6.3基质标准中间溶液精密量取氯倍他索乙酸酯标准溶液(
3.6)
2.0mL,置于100mL容量瓶中,用空白基质提取液(
6.2)稀释至刻度,摇匀,制成氯倍他索乙酸酯质量浓度为200ug/L的基质标准中间溶液
6.4基质标准系列溶液分别精密量取基质标准中间溶液(
6.3)适量,用空白基质提取液(
6.2)配制得到质量浓度为
2、
4、
10、
20、40u g/L基质标准系列溶液(基质标准系列溶液浓度范围可根据实际情况进行调整)基质标准系列溶液应临用新制
6.5样品处理液体(水)类、膏霜乳类、凝胶类、泥类、贴膜类样品称取样品
0.2g(精确到
0.001g),置于10mL具塞比色管中,加入少量乙厝(
3.1),涡旋分散均匀后,加乙月青(
3.1)8mL,超声提取30min,静置至室温,用乙懵(
3.1)定容至刻度必要时,以4000r/min转速离心10min取上清液经
0.22u m滤膜过滤后,滤液作为供试品溶液备用(供试品溶液可根据实际浓度进行适当稀释)
6.
5.2液体(油)类样品称取样品
0.2g(精确到
0.001g),置于10mL离心管中,加入2矶正己烷(
3.2),涡旋分散均匀后,加入70%乙口溶液(
3.3)3mL,涡旋振荡2min,4000r/min离心10min,吸取下层溶液至10mL具塞比色管中,上层正己烷层用70%乙月青溶液(
3.3)3mL,自“涡旋振荡2min,…”起,重复上述步骤一次,合并两次溶液,加70%乙月青溶液(
3.3)定容至刻度,混匀,经
0.22um滤膜过滤后,滤液作为供试品溶液备用(供试品溶液可根据实际浓度进行适当稀释)
6.6仪器参考条件
6.
6.1色谱条件色谱柱一柱(150mm X
2.1mm,
2.7uni),或等效色谱柱;流动相A为水,B为乙胞(
3.Do梯度洗脱程序见表1;流速:
0.4mL/min;柱温35℃;进样量2uLo表1梯度洗脱程序时间min流动相A(%)流动相B(%)
0.
0060402.
0060405.
005956.
505956.
6060408.
0060406.
6.2质谱条件离子源电喷雾离子源(ESI源);监测模式正离子多反应监测模式(MRM),监测离子对及相关参数设定见表2表2氯倍他索乙酸酯监测离子对及相关参数设定母离子子离子CE组分名称m/z m/z V
278.2*24氯倍他索乙酸酯
453.
2263.228*为推荐的定量离子注当采用不同质谱仪器时,仪器参数可能存在差异,测定前应将质谱参数优化到最佳
6.7定性判定取供试品溶液(
6.5)与筛查用标准溶液(
6.1)在相同分析条件下测定,样品中如呈现定量离子对和定性离子对的色谱峰,被测成分的特征离子峰保留时间与筛查用标准溶液(
6.1)对应的保留时间一致,保留时间的相对偏差在±3%内,且选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度的筛查用标准溶液(
6.1)的监测离子对的相对丰度比的最大允许偏差不超过表3的规定,则可以判定样品中存在对应的组分表3定性确证时相对离子丰度比的最大允许偏差相对离子丰度(k)k50%50%2k20%20%2k10%k10%允许最大偏差±20%±25%±30%±50%
6.8定量测定取基质标准系列溶液(
6.4)依次测定,以待测组分的系列浓度为横坐标,待测组分的峰面枳为纵坐标,进行线性回归,绘制基质标准曲线,其线性相关系数应大于
0.99取供试品溶液(
6.5)测定,将对应的定量离子对色谱峰面积代入基质标准曲线按“7”项下公式,计算样品中待测组分的含量
6.9平行试验按上述步骤,对同一样品进行平行实验测定
0.2g时检出浓度和最低定量浓度见表4表4氯倍他索乙酸酯的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度最低定量浓度组分名称检出限ng定量下限ng检出浓度u g/gu g/g氯倍他索乙酸酯
0.
00120.
0040.
030.110图谱
4.67100;%」0——,Time min
2.
004.
006.00图1氯倍他索乙酸酯标准溶液的多反应监测色谱图附录A氯倍他索乙酸酯的相关信息表A.1氯倍他索乙酸酯的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量及结构式中文名称英文名称CAS号分子式相对分子质量氯倍他索乙Clobetasol25122-45-6C24H30CIFO
5452.95酸酯acetate起草单位湖北省药品监督检验研究院主要起草人李丽霞、刘红、杨飘飘、曹全胜验证单位浙江省食品药品检验研究院、深圳市药品检验研究院、北京市药品检验研究院。