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产品名称人白介素邛邛试剂盒IL-ELISA英文名称Human InterleukinlpJL-lp ELISAKIT准确性标准品线性回归与预期浓度相关系数值,大于等于R
0.9900灵敏度:检测浓度小于
0.1pg/mLo特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应重复性板内变异系数小于板间变异系数小于10%,15%贮藏,避光防潮保存:2-8C有效期个月6注本试剂仅供科研,不得用于临床!自备物品酶标仪450nm高精度加样器及枪头、、精、:
0.5-10uL2-20uL20OOuL200-1000uL恒温箱37C自备的设备及试剂滤光片的酶标仪建议仪器使用前提前预热
1.450±10nm单道或多道微量加液器及吸头
2.稀释样品的管
3.EP蒸僧水或去离子水
4.吸水纸
5.盛放洗液的容器6,样品收集、处理及保存方法血清:使用不含热原和内毒素的试管操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后转离心
1.,3000分钟将血清和红细胞迅速小心地分离10血浆:、柠檬酸盐或肝素抗凝转离心分钟取上清
2.EDTA300030细胞上清液转离心分钟去除颗粒和聚合物
3.300010组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎转离心分钟取上清
4.300010,保存如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-,避免反复冻融,在室520C温下解冻并确保样品均匀地充分解冻操作流程如下⑴待测样品孔中每孔加入待测样品苗每种样品设个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未1003处理组的细胞裂解液;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液1003100|jlo⑵酶标板置,包被过夜4C⑶洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡分钟,间歇摇动甩去孔内液体后在吸水纸上拍干重复洗涤次1-23-4⑷阴性对照孔每孔加入,样品孔及空白孔每孔加入稀释的抗体工作液也PBS50kll150050⑸酶标板置培养箱的湿盒内,孵育37C60mino⑹洗板,同⑷⑺每孔加稀释的抗体工作液1:5000lOOkiL酶标板置培养箱的湿盒内,孵育837C60mino洗板同⑷9每孔力口显色液轻轻混匀置暗处反应10TMB1003,10s,37C15-20mino每孔加终止反应Q1100|jl2mol/L H2SO4分别测吸光值和吸光值测得的值为两者之差以减少由Q2450nm W1630nm W2,OD W1-W2,容器上的划痕或指印等造成的光干扰数据处理:在得出标本和阴性对照的值后,计算值为阳性判定标准13S N OD S/N S/N
22.1结果判定方法目测定性法加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于竞争法则浅于阴1性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性2以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2〜3SD,作为阳性结果的阈值以值阳性孔值/阴性孔值大于或等于为阳性;值小于但大于3P/NODOD
2.1P/N
2.1,
1.为可疑;小于为阴性5P/N
1.5定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量4。