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蛋白质的检验双缩胭反应双缩胭试剂biuret reagent是由双缩胭试剂A NaOH和双缩胭试剂B CuS04两种试剂组成.双缩胭试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为
0.1g/mL的水溶液;双缩胭试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为
0.01g/mL的水溶液双缩胭试剂可以验证蛋白质的存在具体方法是先将双缩胭试剂A加入组织样液,振荡均匀必须营造碱性环境,再加入双缩胭试剂B,振荡均匀如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩胭试剂产生紫鱼氏座蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比双缩胭NH2C0NHC0NH2是两个分子服经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物双缩胭试剂本是用来检测双缩胭,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色在使用双缩胭试剂时候,必须注意,必须是先加
0.1g/mL氢氧化钠溶液,再加
0.01g/mL硫酸铜的水溶液若先加入硫酸铜[CuS04]溶液,再加入氢氧化钠[NaOH]溶液,则无法充分制造碱性环境,此时CuS04会与NaOH发生复分解反应,生成蓝色氢氧化铜[Cu0H2]沉淀,导致现象不清,无法较好地达到实验目的.黄色反应含有苯环结构的氨基酸,如酪氨酸和色氨酸遇硝酸后,可被硝化成黄色物质,该化合物在碱性溶液如NaOH中进一步形成深橙色的硝醒酸钠多数蛋白质分子含有带苯环的氨基酸,所以有黄色反应,但苯丙氨酸不易硝化,需加入少量浓硫酸才有黄色反应黄三酮反应除脯氨酸、羟脯氨酸和荀三酮反应产生黄色物质外,所有a—氨基酸及一切蛋白质都能和荀三酮反应生成蓝紫色物质该反应十分灵敏,11500000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应,是一种常用的氨基酸定量测定方法[1]可溶性的还原性糖的检验斐林试剂它是由氢氧化钠的含量为
0.1g/mL的渣通和硫酸铜的含量为
0.05g/mL的溶液,还有含量为
0.2g/mL迺五酸钾钠配制而成的,其本质是新配制的氢氧化铜它与可溶性的还原性糖葡萄糖、果糖和麦芽糖在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。