2蜂蜜菌落总数检验标准

页码1/3山西恒达蕾傲生物科技有限公司技术标准文件编码:SXHD/JS-012版本号01蜂蜜菌落总数检验标准题目制定人樊朝阳审核人郭联合北匕准人王惠颁发部门生产部制定日期:审核日期:批准日期生效日期分发部门办公室、质量部、生产部、供销部、财务部文件编写/修订历史本文件为首次制定目的

1.检验蜂蜜中的菌落总数适用范围

2.本标准适用于对蜂蜜中菌落总数的检验设备和材料3除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下恒温培养箱:

1.136℃±1℃,30-Cil℃o冰箱

1.22℃〜5℃恒温水浴箱:

1.346℃±l℃o天平感量为

1.

40.1g均质器

1.5振荡器

1.6无菌吸管（具

①刻度）、（具刻度）或微量移液器及吸头

1.71mL01mL10mL

0.1mL无菌锥形瓶容量、

3.8250mL500mL无菌培养皿直径

3.990mm计或比色管或精密试纸

3.10pH pHpH放大镜或/和菌落计数器

3.11培养基和试剂4平板计数琼脂培养基见附录中

4.1A A.1磷酸盐缓冲液见附录中

4.2A A-2无菌生理盐水见附录中

4.3A A.3o操作步骤5样品的稀释

5.1蜂蜜样品以无菌吸管吸取样品置盛有磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶

5.

1.125mL225mL内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成110的样品匀液

5.

1.2用1mL无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用支无菌吸管反复吹打使其混合均1匀，制成1100的样品匀液操作程序，制备倍系列稀释样品匀液每递增稀释一次，换用次无菌吸管或吸

5.

1.

35.L21011mL头页码2/3山西恒达蕾傲生物科技有限公司技术标准文件编码:SXHD/JS-002版本号01蜂蜜菌落总数检验标准题目根据对样品污染状况的估计，选择个个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在

5.

1.

4.2〜3进行倍递增稀释时，吸取样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿同时，分别吸101mL取空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照1mL及时将冷却至的平板计数琼脂培养基（可放置于土恒温水浴箱中

5.

1.515mL〜20mL46℃46℃保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀培养

5.2待琼脂凝固后，将平板翻转，培养水产品培养土

5.

2.136〜Cil℃48hi2h30℃±1℃72h3h如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层

5.

2.2琼脂培养基（约）凝固后翻转平板，按条件进行培养4mL,菌落计数

5.3可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量菌落计数以菌落形成单位（）表示colony-forming units,CFU选取菌落数在之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数低于平板记

5.

3.130CFU〜300CFU30CFU录具体菌落数，大于的可记录为多不可计每个稀释度的菌落数应采用两个平板的均数300CFU其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度

5.

3.2的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数

5.

3.3结果与报告6菌落总数的计算方法

6.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平

6.

1.1均值乘以相应稀释倍数，作为每（）样品中菌落总数结果g mL若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式⑴计算⑴

6.

1.2式中样品中菌落数；N——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；EC——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；;71——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；/72——稀释因子（第一稀释度）d——山西恒达蕾傲生物科技有限公司技术标准页码3/3文件编码:SXHD/JS-002版本号01蜂蜜菌落总数检验标准题目若所有稀释度的平板上菌落数均大于则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可

6.

1.3300CFU,记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算若所有稀释度的平板菌落数均小于则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计

6.

1.430CFU,算若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于乘以最低稀释倍数计算

6.

1.51若所有稀释度的平板菌落数均不在之间，其中一部分小于或大于

6.

1.630CFU~300CFU30CFU300时•，则以最接近或的平均菌落数乘以稀释倍数计算CFU30CFU300CFU菌落总数的报告

6.2菌落数小于时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告

6.

2.1100CFU菌落数大于或等于时，第位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前位数字,后

6.

2.2100CFU32面用代替位数；也可用的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字10若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延

6.

2.3若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效

6.

2.4称重取样以为单位报告，体积取样以为单位报告

6.

2.5CFU/g CFU/mL。