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空气消毒模拟现场试验目的1以人工喷雾微生物气溶胶的方法污染模拟现场受试空气,测定空气消毒机用于空气消毒的最低安全使用剂量试验设备和器材2试验菌株白色葡萄球菌株28032培养基营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、含中和剂的营养琼脂培养基(所含中和剂
2.2为按附录鉴定合格者,用于化学消毒因子的空气消毒机消毒后采样)C消毒试验用气雾室气雾室宜以不锈钢、铝合金和玻璃等光洁、耐腐蚀和易清洗的材料
2.3建造相邻的一对(容积均为一个用于消毒试验,另一个用于试验对照一对气雾室所处环20m境(包括温度、相对湿度、光照、密闭性和通风条件等)应一致应安装温度和相对湿度调节装置以及通风机过滤除菌或其他消毒装置和相应管道,开设供喷雾染菌、给药、采样等的袖套操作和样本传递等窗口喷雾染菌装置,包括空气压缩机、压力表、气体流量计和气溶胶喷雾器等喷出细菌气
2.4溶胶微粒的直径以上应在之间90%1u m〜10u m空气微生物采样装置:六级筛孔空气撞击式采样器、抽气设备、气体流量计、计时器等
2.5环境监测器材:温度计、湿度计等
2.6试验菌悬液的制备3取白色葡萄球菌第3〜7代经36℃±1℃培养18〜24h的新鲜斜面培养物,用TPS(胰蛋白豚生理盐水溶液)洗下菌苔,无菌脱脂棉过滤后,用营养肉汤培养基稀释成所需浓度操作程序4待测空气消毒机的安装
4.1试验开始前,按待测空气消毒机的安装说明,将待测空气消毒机安装在试验气雾室远端,连接好电源并确认能够正常工作,同时在对照气雾室内安装去除了空气消毒能力的与待检同型号设备作为对照,然后将门关闭此后,一切操作和仪器设备的操作均在室外通过带有密封袖套的窗口或摇控器进行直至试验结束,才可将门打开试验环境条件设定
4.2开启计算机控制系统(或开启温、湿度调节装置),同时调节两个气雾室的温度、相对湿度至试验要求的温度(20℃〜25℃)和相对湿度(50%〜70%)气溶胶喷雾染菌
4.3分别在对照组和试验组气雾室中,将微生物气溶胶发生器固定在采样车上并使之位于气雾室内中央位置距地面处,按照不同的气溶胶发生装置设定压力、气体流量和喷菌时间喷雾
1.0m染菌边喷雾染菌,边用风扇(搅拌器)搅拌喷雾染菌完毕,继续搅拌静止5min,5min消毒前采样
4.4静止后,同时对对照组和试验组气雾室分别进行消毒前采样,作为对照组试验开始前5min和试验组消毒处理前的阳性对照(即污染菌量)气雾室内空气中各阳性对照菌数应达
543、消毒试验最后一个时间对照组阳性对照菌数不得小于43)10CFU/m-510CFU/m%510CFU/m o消毒处理
4.5按待测空气消毒机的使用说明,开机运行消毒后采样
4.6空气消毒机作用至预定的第一个时间(说明书规定时间的倍),即刻对试验组和对照组
0.5气雾室同时进行采样;继续作用至第二个预定消毒时间(说明书规定的时间),再次按前述方法进行采样采样要求
4.7试验用六级筛孔空气撞击式采样器采样,采样时,将六级筛孔空气撞击式采样器放在气雾室中央高处,采样流量为采样时间依据预测试验确定(一般对照组和试验组消毒
1.0m
28.3L/min,处理前采样5s〜10s,试验组消毒后视其消毒效果,如消毒合格采样5min-10min)培养与结果观察
4.8采样后,无菌操作取出平板,置℃土℃培养箱培养进行活菌培养计数在完成试验36148h组与阳性对照组采样后,将未用的同批培养基与上述两组样本同时进行培养,作为阴性对照若阴性对照组有菌生长,说明所用培养基有污染,试验无效,更换无菌器材重新进行对气雾室消毒处理
4.9全程试验完毕,对气雾室表面和空气中残留的细菌做最终消毒后,打开通风机,过滤除菌排风,排除气雾室内滞留的污染空气理
4.10空气中含菌量计算
5.1空气中含菌量按式(工)计算J=——x
100028.3t式中空气含菌量,单位为菌落形成单位每立方米();六级采样平板上总菌X——CFU/m3S——数,单位为菌落形成单位();采样时间,单位为分()CFU t——min杀灭率的计算
5.2空气消毒机对细菌消毒效果以杀灭率(或清除率)计,数值以(的)表示,按公式()Kt3计算V-VN=/——匚x100tVo(1-m)-VtKt=—————-x100Vo(1—NG式中消毒处理对空气中细菌的杀灭率(或清除率),%;Kt——与试验组消毒处理前和消毒过程中不同时间的空气含菌量,单位为菌落形成单位V0Vt1——每立方米();CFU/m3空气中细菌的自然衰亡率;Nt——与对照组试验开始前和试验过程中不同时间的空气含菌量,单位为菌落形成单位V0Vt——每立方米()CFU/m3重复试验6同一条件试验重复次3结果判定7三次试验结果的杀灭率(或清除率)均可判为消毒合格
299.9%,注意事项8试验中,因控制统一的条件较难,故每次试验均需同时设置试验组与对照组,两组条件
8.1尽量保持一致注意记录试验过程中的温度和相对湿度,以便分析对比
8.2所采样本应尽快进行微生物检验,以免影响结果的准确性
8.3每次试验完毕,气雾室应充分通风必要时消毒冲洗,间隔后才可做第二次试
8.44h验试验时,气雾室必须保持密闭,设有空气过滤装置,以防染菌空气污染环境
8.5试验时,气雾室应防止日光直射,以免造成杀菌作用不稳定
8.6气雾室排风过滤装置中的滤材应定期更换,换下的滤材应经灭菌后再做其他处理
8.7。