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文本内容:
表1苯并(a)花参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量苯并(a)花Benzoapyrene50-32-8C20Hl
2252.32注或等同可溯源物质标准溶液的配制
3.3苯并(a)花标准储备液(
0.1mg/mL)精密称取适量苯并(a)花标准品(
3.2),置于10mL容量瓶中,用乙月青(
3.
1.2)溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓度为
0.1mg/mL的苯并(a)花标准储备液;或可直接购买苯并(a)花标准储备液0℃〜5℃避光保存备用,有效期1年材料
3.4苯并(a)花胶体金免疫层析试剂盒,适用基质为食用油金标微孔(含胶体金标记的特异性抗体)341试纸条或检测卡仪器和设备4移液器、和
4.1100RL、1mL5mL10mL涡旋混合器
4.2离心机转速
4.3N4000r/mino电子天平感量为
4.
40.01g氮吹仪或空气吹干仪(带温度控制)
4.55分析步骤试样制备
5.1取适量有代表性样品充分混匀试样提取和净化除脂
5.2称取油样于离心管中,加入正己烷()和()并混合均匀漩10g5mL
3.
1.115mLDMSO
3.
1.3涡振荡2min,然后4000r/min离心2min弃去上层正己烷层加入5mL正己烷(
3.
1.1),漩涡振荡30s,然后4000r/min离心30So弃去上层正己烷层加入10mL氢氧化钠溶液(2mol/L)(
3.
1.8)和15mL正己烷(),漩涡振荡30s,然后4000r/min离心30s吸取上层正己烷层于15mL离心管,4000r/min离心取全部正己烷层于氮吹管中,氮吹或空气吹吹干后加入()2min50℃10min,200|iLDMSO
3.
1.3复溶,混合均匀,此为待测液测定步骤
5.3打开试纸筒,取出所需数量的红色反应微孔(取出微孔后,立即盖好桶盖,以防受潮)往微孔中加入200pL的PBST溶液,再加入50pL待测液,上下抽吸5〜10次至微孔试剂混合均匀,室温(20℃)反应将已做好标记的试纸条插入至上述红色微孔中,使样品垫充分进〜25℃7min入样品中,并计时从微孔中取出试纸条,弃去试纸条下端的样品垫,进行结果判定7min质控试验
5.4每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验空白试验
5.
5.1称取空白试样,按照和步骤与样品同法操作
5.
25.3加标质控试验
5.
6.2准确称取空白试样(精确至
0.01g)置于玻璃试剂瓶中,加入一定体积的苯并(a)花标准储备液()()使试样中苯并()花浓度为按照和步骤与样品同法操作
0.1mg/mL
3.
3.1,a10pg/kg,
5.
25.3结果判定方式6由于长时间放置会引起质控线(C线)与检测线(T线)颜色的变化,需在规定时间内进行结果判定试纸条与检测卡如图所示结果判定也可根据产品说明书进行1读数仪测定结果
6.1通过读数仪对结果进行判读,根据不同厂家仪器规定进行判读无效质控线(C线)不显色,无论检测线(T线)是否显色,均表示实验结果无效阳性若检测结果显示(阳性),表示试样中含有待测组分且其含量大于等于方法检出限阴性若检测结果显示“」(阴性),表示试样中不含待测组分或其含量低于方法检出限目视判定
6.2通过对比质控线(C线)和检测线(T线)的颜色深浅进行结果判定无效质控线(C线)不显色,无论检测线(T线)是否显色,均表示实验结果无效阳性质控线(C线)显色,若检测线(T线)不出现或出现但颜色浅于质控线(C线),表示试样中含有待测组分且其含量高于方法检出限,判为阳性阴性质控线(C线)显色,若检测线(T线)颜色深于或等于质控线(C线),表示试样中不含待测组分或其含量低于方法检出限,判为阴性质控实睑要求
6.3空白试验测定结果应为阴性,加标质控试验测定结果应为阳性吸水纸线C膜NC线T样品垫无效阴性阳性试纸条A.加样孔一A无效阴性阳性检测卡B.图1目视判定示意图结论7当检测结果为阳性时,应对结果进行确证性能指标8检;则限
8.110|ig/kgo灵敏度
8.295%O
8.3特异性85%O
8.4假阴性率5%o假阳性率
8.515%o注性能指标计算方法参见附录A其他9本方法分析步骤和结果判定可以根据厂家试剂盒的说明书进行,但应符合或优于本方法规定的性能指标本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便,在使用本方法时不做限定方法使用者在使用替代试剂、试剂盒或操作步骤前,须对其进行考察,应满足本方法规定的各项性能指标本方法参比标准为GB
5009.27-2016《食品安全国家标准食品中苯并(a)花的测定》本方法使用试剂盒可能与苯并(a)意、苯并(b)荧意、苯并(e)花、苯并(j)荧慈等物质存在交叉反应,当结果判定为阳性时应对结果进行确证附录A定性方法性能计算表表性能指标计算方法A.1检测结果b样品情况总数a阳性阴性阳性Nil N12NL=N11+N12阴性尸N21N22N2N21+N22,或N=N
1.+N2总数二N.1=N11+N21N.2N12+N22N.1+N.2显著性差异(£)飞=|N12-N21|-12/N12+N21,自由度df=1灵敏度(p+,%)p+=NU/NL特异性(p-,%)p-=N22/N
2.假阴性率(%)灵敏度pf-,pf-=N12/NL=100-假阳性率(pf+,%)pf+=N21/N2=100-特异性相对准确度,%cN11+N22/N
1.+N
2.注由参比方法检验得到的结果或者样品中实际的公议值结果a由待确认方法检验得到的结果灵敏度的计算使用确认后的结果bN任何特定单元的结果数,第一个下标指行,第二个下标指列例如NU表示第一行,第歹U,NL表示所有的第行,N.2表示所有的第二列;N12表示第行,第二列c为方法的检测结果相对准确性的结果,与一致性分析和浓度检测趋势情况综合评价本方法负责起草单位广东省食品检验所验证单位成都市食品药品检验研究院、中国农业科学院油料作物研究所本方法主要起草人熊含鸿、王立亚、简德威、陈思敏、雷毅。