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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分离鉴定及其药敏试验肺炎克雷伯菌kpd通常存在于人体的呼吸道和胃肠道然而,如果人体阻力降低或其他原因引起的典型原发病肺炎、尿道感染和血液感染通常也可能存在这是临床感染最常见的病原体之一肺炎克雷伯菌可以通过产生内酰胺酶、生物被膜的形成以及外膜孔蛋白的缺失等多种机制对抗菌药物而产生耐药性碳青酶烯类抗菌药物是临床治疗产头施菌素酶和超广谱6-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌严重感染的最重要的抗菌药物之一但是随着近年来其临床应用的日益频繁,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌CRKP的检出在全球范围内呈快速增长趋势产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶KPC是CRKP对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制KPC酶能够水解B-内酰胺类及其酶抑制剂复方制剂和碳青霉烯类等多种抗菌药物,CRKP引起的临床患者的感染,可选择抗菌药物极少,近年来CRKP感染已经成为临床患者死亡的重要危险因素1材料和方法
1.1菌株鉴定及药敏试验收集我院2014年1月2017年7月临床科室送检病原学检查标本,按照《全国临床检验操作〜规程》要求进行标本接种和病原菌分离,应用Phoenix100全自动微生物鉴定药敏系统进行鉴定及其药敏试验收集CRKP菌株亚胺培南、美罗培南任1耐药肺炎克雷伯菌于-80℃冰箱保存部分药敏试验采用K-B法检测,抗菌药物纸片为英国Oxoid公司生产多黏菌素、替加环素药敏结果根据欧洲抗菌药物敏感性试验委员会EUCAST标准进行判读,其他抗菌药物药敏试验结果判断参照美国临床与实验室标准化协会CLSI2016年M100-26标准
1.2麦氏浊度菌悬液的制备采用改良Hodge试验modified Hodgetest,MHT,将大肠埃希菌ATCC
259220.5麦氏浊度菌悬液用无菌生理盐水110稀释,均匀涂布于MH平板上,室温干燥310min后,中〜间贴美洛培南,用待检菌自纸片边缘向平板边缘划线35℃培养1824h后观察结果结〜果判断:美洛培南抑菌圈内出现矢状生长者为产碳青霉烯酶菌株
1.3头把他噫胶片观察用
0.5麦氏单位的待检菌悬液涂布MH平皿,中心贴EDTA纸片,周围分别贴亚胺培南、美洛培南及头抱他咤纸片相距10mm o35℃培养1824h后观察结果结果判断:在靠近EDTA〜侧抑菌圈明显扩大者分别为产金属酶菌株
1.4质量控制菌株肺炎克雷伯菌ATCC700603和大肠埃希菌ATCC25922均购自原国家卫生计生委临床检验中心
1.5统计方法采用Whonet
5.6软件进行分析剔除重复菌株2结果
2.1标本来源及分布共收集156株CRKP菌株,儿童W18岁41株,成人18岁115株主要分离自呼吸道标本、血液和尿液等标本;病区分布以ICU、神经科、呼吸科及老年病区为主见表
1、表2o
2.2药物敏感率CRKP菌株对多黏菌素有较好的敏感性100%,对替加环素、米诺还素和四环素的敏感率分别为
92.9%.
88.5%和
64.1%;对甲氧苇咤/磺胺异悲理、阿米卡星的敏感率分别为
39.7%和
29.5%,氯霉素
30.1%,左氧氟沙星
23.1%;对B内酰胺类高度耐药儿童组分离CRKP对阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性高于成人组,差异有高度统计学意义P
0.01见表
32.3抗癫痫机制的检测156株CRKP H-J实验122株阳性
78.2%,4株金属酶阳性
2.6%3crkp耐药基因碳青霉烯类抗菌药物因其具有抗菌活性强、抗菌谱广的特点,一直被作为治疗肠杆菌科细菌感染最有效的抗菌药物.但是随着其临床应用日益频繁,近年来CRKP的检出率呈快速上升趋势因为其携带碳青霉烯酶耐药基因的质粒可以在不同菌株间水平传播甚至质粒介导的耐药基因传播到其他菌种本研究结果表明,我院临床分离CRKP耐药主要以产碳青霉烯酶为主
78.2%,但表现为对多粘菌素与四环素类之外的抗菌药物均严重耐药细菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制有总之,CRKP对多黏菌素和四环素类以外的临床常用抗菌药物敏感性差,临床治疗CRKP感染可选用的抗菌药物非常有限应强化对CRKP的认识,加强对ICU、神经科和老年病科呼吸道感染患者的管理,及早发现CRKP感染或定植患者,加强防控措施,严防CRKP的传播。