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文件编号GC-WI.-01***中心医院检验科微量元素检测版序第1版生效日期2022年4月1日操作规程文件复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第1页共5页铅、镉元素检测WLKWLL检验目的铅中毒主要累及神经、血液、造血、消化、心血管和泌尿系统,浮现头痛头昏失眠多梦、记忆力减退,牙齿边缘有蓝线;镉中毒表现为口干、口内金属味、咽痛、乏力、呼吸艰难、蛋白尿、骨变形、肝坏死等主要累及肺、肾、嗅觉、骨骼、睾丸、肝脏等WL2,测定方法铝舟加热原子吸收法WL
3.实验原理待测兀素的化合物在高温下进行原子化,被解离为基态原子当锐线光源发射出的特征谱线,穿过一定厚度的原子蒸汽时,光的一部份被原子蒸汽中待测元素基态原子吸收,检测系统测量出透射光的强弱变化,根据光吸收定律吸光度大小与原子化器中待测元素原子浓度成正比的关系,求得待测元素含量将血液直接加入专用稀释液中,混匀斤-次进样,采用复合空心阴极灯,自吸收背景扣除,以波长
283.3nm(铅)
228.8nm(镉),可同时测定血液中铅、镉元素含量WL
4.标本要求WL
4.
1.标本类型新鲜采集的末梢血或者静脉血(静脉血用肝素抗凝剂,不能用EDTA,枸椽酸钠等抗凝剂)WL
4.2标本采集与处理血样采集在采血间进行采血人员应戴乳胶或者聚乙烯手套若手套涂粉,接触受检者或者血样前应先用静脉采血皮肤清洁法处理手套后再进行操作
4.3采集静脉血1按顺序用
0.2%硝酸、纯水、碘酒、酒精(或者用约5%“洗洁净”棉球、2%依地酸钠棉球、酒精棉球清洁取血区皮肤2使用经过检验的同一批号的一次性注射器抽取静脉血,穿刺成功后即将松开止血带如使用真空采血管可直接注入,并即将摇晃均匀如使用聚乙烯管留置样本,应当留存双份样本,每管血样为
0.5~lnd,注入后即将摇晃均匀,与抗凝剂充分混合
(2)采集末梢血1在等候间用肥皂子细的搓洗被采血者的双手,特殊是拟采血的手指,用温水冲洗后,再用经空白检验的纸巾将手榛干,并用纸巾将拟采血的手指包住,等待进入采血间如果是婴幼儿,护理婴幼儿的成人也应同时洗手1岁以下婴幼儿可以采集拇趾或者足跟部血2在采血间用
0.2%硝酸、纯水、碘酒、酒精(或者用约5%“洗洁净”棉球、2%依地酸钠棉球、酒精棉球)先后清洁拟采血的中指或者无名指,自然晾干,用一次性刺血针(有条件时可以使用可回缩的采血器)刺破中指或者无名指指腹的侧面指甲边沿至指肚中线的1/2处,即将转动手指,使刺破口向下,让血液形成自然血滴流出,抛却第一滴血液,用经过上述方法处理过的聚乙烯小管采集血修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC-WL-02***中心医院检验科版序第1版微量元素检测操作规程文件生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第4页共4页
5.仪器主机、微机、打印机用电源为单相220V±22V500VA频率50Hz±1Hz如果供给原子吸收光谱仪及微机系统的电源电压变化大于要求,则必须外配抗干扰交流稳压电源
6.对实验室供电时,其进线应与大功率设备或者形成强电磁场干扰设备的进线分开,且不要和光谱仪的电弧、火花等光源在同一场所使用
7.使用本仪器进行测定时,会排出有害气体,因此,原子化器上方必须装有排风设备排风量大小以一张厚纸板贴在抽风口处,能被轻轻吸住未宜
8.安放仪器用的工作台,应结子、坚固、平整,能承重150Kg,能保持承重后不变形工作台台面耍平整,上铺防震耐腐蚀的塑料板或者橡胶板台面的水平状态不应随时间而改变工作台四周应留出空间,以便从仪器暗地里连接电路、气路和检修仪器
9.为保证仪器稳定工作和安全操作,实验室应具有良好的接地条件仪器的地线最好接到一块直接埋入地下1米的金属板上,接地电阻小于〈
0.1Q
10.定期检查气路是否漏气
11.开机前一定要检查是否打开氤气阀门,在没有保护气下空烧会严重损坏鸽舟的寿命
12.及时清理金属炉(鸨舟原子化器)内的灰尘,以免影响测量结果的精度
13.时常检查金属炉(鸨舟原子化器)两侧的石英窗的透光度和上方炉盖及拔烟罩的清洁度,如有污物,用干净的脱脂棉蘸无水乙醇小心擦拭,注意轻拿轻放
14.拆卸和安装元素灯时,不要直接将灯拆下或者插入,应该将灯旋转插入或者拔出以防灯损坏
15.当主机电流超过额定电流时,主机上的保险丝会烧断,这时,需要检查主机背板上的两个保险丝(熔断器),将怀的更换
16.氨气钢瓶属于高压气瓶,使用时应严格执行国家劳动总局颁发的《气瓶安全监察规程》
17.仪器在正常工作时,如遇到蓦地停电,应即将关闭氨气钢瓶阀门以及主机、计算机、打印机的电源开关WL11参考文献
1、微量元素仪器使用说明书
2、叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京东南文字出版社,
20223、李中信主编.现代临床实验诊断手册.天津科学技术出版社,
4.3标本存储与稳定性样品用冰瓶运送实验室样品暂不检测时,可置冰箱内46℃保存一周,低温(-18℃)〜可长期保存WL
4.4标本量40u1末梢血或者静脉血WL
4.5不可接受样本有污染的样本WL
5.仪器和试剂WL
5.1仪器BH2100原子吸收光谱仪WL
5.2试剂准备随机配置专用试剂,密封存储于室温时(030C)使用有效期同试剂盒上标注时间一致〜WL
6.校准与溯源性WL
7.质控品与质量控制质控品是博晖公司提供的国家二级标准物质GBW(E)090033-090036o存储与使用详见标物说明书WL
8.检测流程【仪器预热】
①打开计算机并启动专用软件
②打开BH2100仪器电源开关
③点击绿色start图标联机,屏幕上浮现闪烁的数字表示联机成功
④调节调控参数,使其能量达到100710之间,预热10分钟以上【仪器工作状态调整】1预热完成后,重新调节调控参数,使其能量达到100T10之间2打开氮气气瓶开关,调节副表压力至
0.2MPa3点击空烧图标,调节氤气流量到L5L/min
④选择合适的温控参数从下拉菜单选择其它栏,查看铝舟使用次数,如下表鸽舟使用0-100100-200200以上次数温控方式方式三方式二方式二或者方式如鸨舟使用次数超过300次,就考虑更换鸨舟,并将鸨舟使用次数回零【标准曲线制作】
①空烧一次点击空烧钮让仪器完成一次空烧过程
②设置测量参数点击测量参数钮,选择重新标样,设置各项参数,如下表修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC—WL—01***中心医院检验科微量元素检测操作规程文件版序第1版生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤编写者黄玉斌责任部门微量元素室页码第3页共5页参数默认值选择值选择值范围选择值原因标样重复次数11或者21-20多次重复可提高曲线精度样本重复次数111-20多次重复可提高测量精度、一方式一为两点定标浓度输入方式一或者方式一方式一方式一方式二为三点定标3加样用微量移液器吸取30u1标准溶液,打开原子化器上方的拔烟罩,将标准溶液加入鸨舟的样品池内,盖好拔烟罩,点击空格键测量4分别加入
0、
1、2号(方式一)或者
0、
1、
2、3号(方式二)标准溶液测量,完毕后系统自动生成标准曲线5调整曲线或者重新标样如标准曲线的相关系数不能达标(Pb:r
0.9950,Cd:r
0.9900),需要做调整或者重新标样直至曲线达标止【标本检测】1标本需要与室温相同情况下才干检测,如从冰箱中取出的要在室温下放置半小时再开始测量2配制质控样,用微量移液枪取40u1质控品(GBW(E)090033—36)加入盛有专用稀释液(
0.36ml)的离心管中,盖紧离心管盖,充分混匀备用3检测质控样,测量结果就在标准物质证书所标不确定度范围内4检测样本,用微量移液器吸取30被测血样,打开原子化器上方的拔烟罩,将标准溶液加入鸨舟的样品池内,盖好拔烟罩,点击空格键测量,测量结果自动生成5每检测10个血样就要插入一个质控样,质控样合格,之前10个血样的检测结果才有效,否则重做之前的10个血样WL
9.参考范围元素名称样本类型标准国际单位铅全血0--------100微克升镉全血05微克升WL
10.结果计算【结果报告】
①输入病资料,按卫生部临床检验标准要求输入病人资料后将血样检测结果打印
②异常结果处理对结果低于本方法学检出限的结果,应报告“未检出”,结果高于200u g/1儿童的应建议患者复查静脉血平行样进一步诊断
③对儿童血铅报告应参照《儿童高铅血症和铅中毒处理原则(试行)》中的诊断与分级修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC—WL—01***中心医院检验科微量元素检测操作规程文件版序第1版生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第4页共5页WL
11.注意事项L实验室附近不应有剧烈震动的装置或者设备
2.实验室附近无强电磁场干扰
3.实验室应与化学实验室分开,以防止酸、碱及其它腐蚀性气体或者烟雾侵蚀仪器的光学及精密机械零件
4.实验室应保持清洁、干燥、无尘
5.仪器主机、微机、打印机用电源为单相220V±22V500VA频率50Hz±1Hz如果供给原子吸收光谱仪及微机系统的电源电压变化大于要求,则必须外配抗干扰交流稳压电源
6.对实验室供电时,其进线应与大功率设备或者形成强电磁场干扰设备的进线分开,且不要和光谱仪的电弧、火花等光源在同一场所使用
7.使用本仪器进行测定时,会排出有害气体,因此,原子化器上方必须装有排风设备排风量大小以一张厚纸板贴在抽风口处,能被轻轻吸住未宜
8.安放仪器用的工作台,应结子、坚固、平整,能承重150Kg,能保持承重后不变形工作台台面要平整,上铺防震耐腐蚀的塑料板或者橡胶板台面的水平状态不应随时间而改变工作台四周应留出空间,以便从仪器暗地里连接电路、气路和检修仪器
9.为保证仪器稳定工作和安全操作,实验室应具有良好的接地条件仪器的地线最好接到一块直接埋入地下1米的金属板上,接地电阻小于<
0.1Q
10.定期检查气路是否漏气1L开机前一定要检查是否打开氤气阀门,在没有保护气下空烧会严重损坏鸨舟的寿命***中心医院检验科文件编号GC-WL-01版序第1版生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第5页共5页
12.及时清理金属炉(鸽舟原子化器)内的灰尘,以免影响测量结果的精度
13.时常检查金属炉(鸨舟原子化器)两侧的石英窗的透光度和上方炉盖及拔烟罩的清洁度,如有污物,用干净的脱脂棉蘸无水乙醇小心擦拭,注意轻拿轻放
14.拆卸和安装元素灯时,不耍直接将灯拆下或者插入,应该将灯旋转插入或者拔出以防灯损坏
15.当主机电流超过额定电流时,主机上的保险丝会烧断.这时,需要检查主机背板上的两个保险丝(熔断器),将怀的更换
16.氯气钢瓶属于高压气瓶,使用时应严格执行国家劳动总局颁发的《气瓶安全监察规程》
17.仪器在正常工作时,如遇到蓦地停电,应即将关闭氤气钢瓶阀门以及主机、计算机、打印机的电源开关WL11参考文献
1、微量元素仪器使用说明书
2、叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京东南文字出版社,
20223、李中信主编.现代临床实验诊断手册.天津科学技术出版社,
1997.372修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC—WL—02***中心医院检验科微量元素检测操作规程文件版序第1版生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第1页共4页WL
2、铜、锌、钙、镁、铁元素检测WL
1.检验目的是人体必须的微量元素,可以为临床医生及患者的诊断治疗提供准确的数据WL2,测定方法火焰原子吸收法、WL
3.实验原理复合元素空心阴极灯发射出的一束特定波长的特征谱线,穿过火焰原子化器上方火焰中,样本原子化过程中产生的待测元素的自由基态原子,对特征谱线产生部份吸收,未被吸收的部份透射过去,应用光学检测系统测量特征谱线光强大小,根据朗伯一比耳定律,通过标准曲线方法检测样本中铜、锌、钙、镁、铁元素的含量WL
4.标本要求WL
4.
1.标本类型新鲜采集的末梢血或者静脉血(静脉血用肝素抗凝剂,不能用EDTA、枸檬酸钠等抗凝齐1」)WL
4.2标本采集与处理WL
4.
2.1严格按照医疗卫生操作规程要求,用酒精棉球彻底清洁、消毒被检测者无名指肚,静候待干轻轻捏紧被检测者手指使指肚部皮肤绷紧,以一次性采血针快速刺穿指肚外侧皮肤,使血液自然流出,尽量不要挤压或者从手指近端轻轻挤压,第一滴血用滤纸擦拭弃掉用微量吸管准确吸取40H1血样,管尖外壁附着血液用滤纸拭去,将吸管伸入装有
1.2血稀释液的离心管内液面下
3、4毫米,轻轻缓慢排出血液,吸取清澈稀释液至40ul刻度摆布再挤出,重复一两次此清洗操作★注意事项操作时微量吸管头部不要接触其它物体表面,操作者手指不要接触稀释剂离心管帽内面,以免造成血液样本污染WL
4.
2.3盖紧稀释剂离心管的翻盖,轻轻摇晃混均★警告a采血时挤压操作可能导致血液标本被组织液稀释,标本中红细胞浓度降低,而铁、锌元素主要存在于红细胞内,从而引起铁、锌元素测量结果假性偏低误差b样本采集过程中的加样量误差可以导致测量结果的误差WL
4.3标本存储与稳定性待测样本暂时不能检测时,可置于冰箱内冷藏保存,可以保存7天摆布,检测前取出放置达到室温平衡WL
4.4标本量40U1末梢血或者静脉血修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC—WL—02***中心医院检验科微量元素检测操作规程文件版序第1版生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第2页共4页WL
4.5不可接受样本有污染的样本WL5,仪器和试剂WL
5.1仪器BH5100原子吸收光谱仪WL
5.2试剂准备随机配置专用试剂,密封存储于室温时0~30℃使用有效期同试剂盒上标注时间一致WL
6.溯源性溯源品名称级别标准物质编号铜、锌、钙、镁、铁、国家二级标钾、钠溶液成份分析标GBWE080915—080917准物质准物质WL7,质控品与质量控制质控品是博晖公司提供的国家二级标准物质GBW E080915-080917o存储与使用详见标物说明书WL
8.检测流程【仪器预热】1打开计算机并启动专用软件2打开BH5100仪器电源开关3点击绿色start图标联机,屏幕上浮现闪烁的数字表示联机成功4静态预热调节调控参数,使其能量达到100T10之间,预热20分钟以上如果元素灯浮现老化现象则要适当延长预热时间
⑤打开空气压缩机,调节输出压力至
0.3MPa
⑥打开乙快气瓶开关,将副表压力调至O.IMPa
⑦点火预热将点火枪枪头置于燃烧头上方,按下打火钮,然后打开仪器的乙焕安全开关至有火焰燃烧,继续预热10分钟【仪器工作状态调整】1调控参数调节,点击自动调整,重新调整调控参数使能量达到100T10之间2调节火焰高度旋转空气流量调节阀将空气流量调节至8L/min,旋转乙快流量调节阀将乙快流量调节至2L/min摆布,再微调乙快流量至火焰上沿与仪器上平面平齐,且无黄色焰心【标准曲线制作】1设置测量参数,选择重新标样,调入标样浓度,注意标样浓度要与标准溶液的实际浓度一致在一不同版本的软件中会浮现读数延时为
3.0s,应将其改为0s.点击确定完成测量参数设置,自动切换至标准样本测量界面2进样将毛细吸样管插入厂家提供的应用标准溶液瓶中的液面以下,观察屏幕上的吸光度曲线平稳修改时间修改内容修改者批准者生效日期文件编号GC—WL—02***中心医院检验科微量元素检测版序第1版操作规程文件生效日期2022年4月1日复审者辛崇国审核者郭建坤责任部门微量元素室编写者黄玉斌页码第3页共4页后,按空格键读数
③建立曲线按标准溶液进样顺序挨次读数,自动浮现曲线图形,五种元素的相关系数均达到
0.9990以上,且灵敏度达标(如下表)方为合格元素Cu ZnCa MgFe一号标液吸光度(AA)
0.
00.
040.
00.
060.25006000234如曲线相关系数不能达标,重做曲线,仍不能达标则需要更换标准溶液后重做曲线如灵敏度不能达标,则疏通或者更换雾化器后,重做标准曲线5曲线完成后点击确定,自动进入样本测量界面【标本检测】1被测样本要与室温相同才干测量,如从冰箱取出,需要在室温下放置半小时以上再进行测量2打开样品离心管时应注意,手或者手套的任何部位都不能接触离心管盖的内沿3进样将毛细吸样管插入样品离心管液面以下,观察屏幕上的吸光度曲线平稳后,按空格键读数五种元素吸光度结果一次性浮现在屏幕上【结果报告】
①输入病人资料,病人资料可以在测量前输入也可以在测量后输入,病人资料的项目可以选择
②合并文件样品测量完毕后,点击报告文件图标,合并文件,可选择方式打印,将结果输出
③测量结果参考值是公司参考文献资料和本公司在北京地区所做大样本统计得出的,有一定代表性,但不能涵盖全部,其值仅供临床医生参考WL
9.参考范围元素名称样本类型参考范围(标准国际单位)全血
11.8——
39.3微摩尔铜锌全血
76.5—--170微摩尔钙全血
1.55—-—
2.10毫摩尔镁全血
1.12—-—
2.06毫摩尔全血
7.52——
11.8毫摩尔铁WL
10.注意事项
1.实验室附近不应有剧烈震动的装置或者设备
2.实验室附近无强电磁场干扰
3.实验室应与化学实验室分开,以防止酸、碱及其它腐蚀性气体或者烟雾侵蚀仪器的光学及精密机械零件
4.实验室应保持清洁、干燥、无尘修改时间修改内容修改者批准者生效日期。