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文本内容:
YU NN ANN OR MAL UN IVERSITY发酵工程学实验报告实验
三、乳酸菌的分离和酸奶的制作学院生命科学学院______________专业应用生物教育______________班级12应生A班_______________姓.名李顺昌____________________________学号124120218______________实验课程.乳酸菌的分离和酸奶的制作指导教师许波___________________________开课学期2014-2015学年下学期实验
三、乳酸菌的分离和酸奶的制作小组合作是小组成员李顺昌、李媛媛、方淑萍、周玉坤
一、实验目的.掌握分离纯化微生物的基本方法
1.掌握酸奶制作的基本原理
2.学会酸奶的制作方法3
二、实验设备与材料、仪器设备三角瓶、平皿、试管、移液管、玻璃涂布棒、灭菌锅、超净工1作台、培养箱、恒温摇床、冰箱等、材料市售酸奶、奶粉、白糖、棉花、酸奶瓶(自备,个/人)等
21、培养基乳酸菌分离用3乳酸菌分离用培养基牛肉膏;酵母膏;蛋白陈;葡萄
0.5%
0.5%1%糖:1%;乳糖;;琼脂;
0.5%NaCl
0.5%
2.5%pH
6.8配制组,装于个三角瓶250mL/2
三、实验原理、酸奶制作的基本原理1()酸奶以牛奶为主要原料,接入一定量乳酸菌,经发酵后制成的一种乳1制品饮料()生理生化原理2牛奶(乳糖)一接种乳酸菌一半乳糖甘酶一乳糖(半乳糖和葡萄糖)一B-D-乳酸发酵(葡萄糖)一乳酸一破坏钙-酪蛋白-磷酸复合物的稳定性一蛋白质凝结一酸奶、提供适宜的生长条件、采用一定的微生物分离纯化方法,就能够从酸奶中2分离出乳酸菌、酸奶中含有乳酸菌的菌体及代谢产物,因而对人体的肠胃消化道疾病有良3好的治疗效果
四、实验方法步骤
(一)乳酸菌的分离纯化一一稀释涂布平板法、倒平板(约块)16/100ml、制备酸奶稀释液2()将酸奶吸入无菌水(自备)中,摇动;
10.5mL
4.5mL5min()用无菌吸管吸出酸奶悬液,加入盛有无菌水的试管中,充
20.5mL
4.5mL分混匀,制备得到稀释液;10-2()再从中吸出加入盛有无菌水的大试管中,混匀后得到
30.5mL
4.5mL10-3稀释液;()以此类推,分别制备得到、、酸奶稀释液410-410-510-
6、涂布3用无菌吸管分别吸取、和稀释液各对号放入已经写好10-310-410-
50.1mL,记号的平板中央,用无菌玻璃涂棒涂匀(每个稀释度涂块平板)
2、培养倒置培养437℃2-3d、观察菌落特征(周二中午)5扁平型菌落大小为边缘不整齐,很薄,近似透明状,染色镜检为2-3mm,细杆状;半球状隆起菌落大小为隆起成半球状,高约边缘整齐且四l-2mm
0.5mm,周可见酪蛋白水解透明圈,染色镜检为链球状;礼帽形突起菌落大小为边缘基本整齐,菌落中央呈隆起状,四周较l-2mm,薄,有酪蛋白水解透明圈,染色镜检亦为链球状、分离纯化(周二)挑取符合上述特征的单菌落,划线于平板,倒置637℃培养约(下周四中午);如发现杂菌需重复上述步骤(纯化)直到获得纯培养2d
(二)酸奶的制作、菌种的制备1()将分离纯化所得到的乳酸菌分别接种于培养基中(瓶)(下周1LB30ml/早上);4()摇瓶培养约(下周晚)237℃200r/min48h
5、牛奶的配制2复原牛奶(以组为单位,瓶/人)奶粉+开水+白糖(可据个人口味调18%整)新鲜牛奶新鲜牛奶白糖+8%、装瓶、包扎约瓶,两层牛皮纸3200mL/、灭菌将牛奶和移液管于灭菌、冷却至约4120℃20min40℃、接种接种后用无菌吸管充分搅拌均匀,包扎并在牛皮纸上写上姓名5
①接种市售酸奶按牛奶量的用无菌吸管接种市售酸奶(人操作/组)5%,1
②接种分离所得乳酸菌按(复原)牛奶量的用无菌吸管接种液体培养5%,的乳酸菌一一嗜热乳链球菌和保加利亚乳杆菌()
11、培养的温箱中培养数小时(视凝乳情况而定),培养过程中切642-43C勿摇动、冷藏酸奶在发酵形成凝块后,应在的低温下保持小时以上,称74-7C24为后熟阶段,以获得酸奶特有的风味和口感、品味(下周早点)酸奶质量的评定以品尝为标准,通常有凝块状8110态、表层光洁度、酸度及香味等多项指标
五、实验报告第一部分实验乳酸菌的分离纯化L
(一)实验现象、数据及结果
(二)分析与讨论
(三)结论
(四)实验总结
1、本次实验成败之处及其原因分析
2、本实验的关键环节及改进措施
①做好本实验需要把握的关键环节;
②若重做本实验,为实现预期效果,仪器操作和实验步骤应如何改善
3、对实验的自我评价.第二部分实验酸奶的制作2
(一)实验现象、数据及结果
(二)分析与讨论
(三)结论
(四)实验总结
1、本次实验成败之处及其原因分析
2、本实验的关键环节及改进措施
①做好本实验需要把握的关键环节;
②若重做本实验,为实现预期效果,仪器操作和实验步骤应如何改善
3、对实验的自我评价
六、思考题。