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文本内容:
《DNA的粗提取与鉴定》课件•DNA的粗提取与鉴定的实验原理•实验材料和器具•实验步骤和方法•实验结果和数据分析目•实验注意事项和安全提示录contents01DNA的粗提取与鉴定的实验原理DNA的化学组成和特性DNA的化学组成DNA的稳定性DNA由磷酸、脱氧核糖和含氮碱基DNA具有高度的稳定性,不易被化学(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧或物理因素破坏啶)组成DNA的双螺旋结构DNA呈双螺旋结构,两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕DNA粗提取的原理010203细胞破碎去除杂质沉淀DNA通过机械或化学方法破碎通过离心、过滤等方法去在DNA溶液中加入高盐溶细胞,使细胞膜和细胞壁除细胞碎片、蛋白质和其液或酒精,使DNA沉淀析破裂,释放出细胞内的他杂质出DNADNA鉴定的原理染色反应利用二苯胺试剂在沸水浴条件下与DNA反应生成蓝色产物,通过观察颜色的变化判断DNA的存在电泳分离利用电场作用使DNA在凝胶电泳中分离,通过观察电泳结果判断DNA的大小和纯度02实验材料和器具实验材料新鲜鸡血或猪血蒸馏水NaCl溶液(
0.14mol/L)实验材料柠檬酸钠溶液酒精溶液(体积分数95%)冰醋酸实验材料01020304蒸馏水二苯胺试剂蓝色墨水浓盐酸实验器具离心管离心机移液管玻璃棒漏斗和纱布烧杯实验器具滤纸试管和试管架剪刀电炉天平实验试剂NaCl溶液(
0.14mol/L)用于细胞酒精溶液(体积分数95%)用于析裂解,分离出核物质,调节溶液的离出DNA子强度柠檬酸钠溶液抗凝剂,防止血液凝固实验试剂01020304冰醋酸二苯胺试剂浓盐酸蓝色墨水调节溶液pH至
3.0左右,使用于鉴定DNA在沸水浴中使DNA中的双螺旋结构打开,用于染色,便于观察DNA的DNA完全溶解加热使DNA完全溶解,加入完全溶解分布和含量二苯胺试剂后呈现蓝色03实验步骤和方法粗提取DNA的步骤准备实验材料破碎细胞溶解细胞核去除杂质包括鸡血细胞、蒸馏水、将鸡血细胞与洗涤剂混将混合物离心,去除上加入食盐,搅拌至完全洗涤剂、食盐、离心管、合,用玻璃棒搅拌,使清液,留下粘稠的DNA溶解,使DNA充分释放离心机等细胞破碎粗提取物纯化DNA的步骤溶解粗提取物离心分离将DNA粗提取物放入蒸馏水中,将溶液离心,去除上清液,留搅拌至溶解下DNA沉淀调节PH值洗涤DNA加入醋酸,调节PH值至
5.0左右,用70%乙醇洗涤DNA沉淀,去使DNA沉淀除残留的盐分和杂质鉴定DNA的步骤制备鉴定板点样在鉴定板上标明样品名称和编号用毛细管将DNA样品点在鉴定板上观察颜色反应结果分析观察DNA样品是否呈现蓝色或绿色,根据颜色反应的结果,分析实验结果以确定是否含有DNA是否符合预期,并记录实验数据04实验结果和数据分析观察和记录实验结果观察DNA在细胞中的分布通过显微镜观察,记录不同细胞在不同处理下的1变化,如染色后DNA的分布和形态记录DNA粗提取物外观观察提取的DNA粗提物颜色、质地、透明度等特2征,并记录下来记录DNA鉴定结果根据DNA的特性,如溶解温度、紫外吸收等,记3录鉴定结果数据分析数据解读根据实验目的和预期结果,对数据数据分析方法进行解读,判断实验是否达到预期目标采用表格、图表等形式,对实验数据进行整理和比较,以便更好地分析数据可靠性分析对实验数据进行可靠性分析,判断实验结果的可靠性和可重复性结果解释和结论结果解释根据实验结果和数据分析,对实验结果进行解释,分析实验成功或失败的原因结论总结根据实验结果和解释,总结实验结论,提出对实验的改进建议或对实验现象的进一步探究方向05实验注意事项和安全提示实验操作注意事项实验前确保所有器具已经清洗干净,避免杂质污染DNA01使用锋利的刀具切割洋葱,在加入蒸馏水后,要充分搅确保细胞被充分破坏拌,确保DNA充分溶解0203在加入酒精后,要充分摇匀,在过滤时,要确保滤纸没有0405确保DNA充分析出破损,防止杂质进入滤液安全提示避免使用尖锐的器具,防止意外伤害避免将试剂直接溅入眼睛或口中,如果不慎发生,立即用大量清水冲洗,并及时就医实验结束后,要将废弃物按照规定分在实验过程中,要保持实验室的清洁类处理和卫生实验误差来源和解决方法器具不干净确保所有器具已经清洗干净,尤其是刀具和滤纸等直接接触DNA的器具操作不规范严格按照实验步骤进行操作,不要省略或调换实验步骤试剂不纯确保使用的试剂是高质量的,没有杂质或污染物环境因素保持实验室的温度和湿度在适宜的范围内,避免环境因素对实验结果产生影响THANKS感谢观看。