还剩22页未读,继续阅读
本资源只提供10页预览,全部文档请下载后查看!喜欢就下载吧,查找使用更方便
文本内容:
《电泳分离》课件目•电泳分离技术概述•电泳分离的基本原理•电泳分离的实验操作录•电泳分离的优缺点•电泳分离的实际应用案例01电泳分离技术概述电泳分离技术的定义原理带电粒子在电场中受到电场力的作用,向相反电荷的电极移动,从而实现分离定义电泳分离技术是一种利分类用电场力对混合物中的带电粒子进行分离和纯根据电泳介质的不同,化的技术电泳分离技术可分为凝胶电泳、等电聚焦电泳、SDS-PAGE电泳等电泳分离技术的应用领域生物领域医学领域环境科学领域用于蛋白质、核酸等生物大分子用于药物分离、血液检测、病毒用于水体、土壤等环境样品中污的分离和纯化,如蛋白质组学研分离等,如制备单克隆抗体、分染物的分离和检测,如重金属离究、基因表达分析等离病毒等子、有机污染物等电泳分离技术的发展历程1930年代1970年代最早的电泳技术诞生,主要用SDS-PAGE技术的发明,为蛋于氨基酸和肽类的分离白质的分离提供了有效手段1950年代1980年代至今凝胶电泳技术的出现,使得大电泳技术不断发展,出现了多分子物质的分离成为可能种新型电泳技术,如毛细管电泳、芯片电泳等,应用领域也不断扩大02电泳分离的基本原理电泳分离的物理基础010203分子运动电场力迁移率电泳分离基于带电粒子在带电粒子受到电场力的作粒子在电场中的运动速度电场中的运动,即分子在用,电场力的大小取决于称为迁移率,它与粒子所电场中的运动粒子所带电荷的数量和电带电荷的数量、电场强度场强度和粒子自身的性质有关电泳分离的化学基础缓冲溶液离子强度离子类型电泳分离通常在缓冲溶液缓冲溶液中的离子强度对不同离子的迁移率不同,中进行,缓冲溶液可以维电泳分离效果有影响,离因此电泳分离过程中不同持电泳过程中的pH值稳定子强度过高或过低都会影离子会形成不同的电泳带响分离效果电泳分离的技术参数010203电泳电压电泳电流分离胶浓度电泳电压是影响电泳分离效果的电泳电流也是影响电泳分离效果分离胶浓度决定了凝胶的孔径大重要参数,电压越高,带电粒子的重要参数,电流越高,分离效小和分离范围,不同浓度的分离的迁移率越大,分离速度越快果越好胶适用于不同的分离需求03电泳分离的实验操作实验前的准备实验材料准备电泳仪、电泳槽、凝胶板、电极缓冲液、DNA样品等实验设备确保电泳仪正常工作,检查电源连接和电极缓冲液的配制安全措施佩戴实验服和护目镜,确保实验区域干净整洁,遵守实验室安全规定实验操作步骤凝胶板制备加样根据需要选择合适的凝胶浓度,按照配方将DNA样品加入到凝胶孔中,注意不要产混合凝胶原料,倒入模具中,待凝胶凝固生气泡,每个孔加入不同浓度的DNA样品电泳染色和观察接通电源,调整电流和电压,开始电泳分在凝胶上加入荧光染料,观察DNA分子的离注意观察电泳进程,记录电泳时间和迁移情况,拍照记录电流的变化实验结果分析数据分析结果解释测量DNA分子的迁移距离,计算迁移率和分子根据DNA分子的迁移率和分子量,推断DNA分量,分析数据并绘制图表子的结构和大小,比较不同样品之间的差异实验结论总结实验结果,阐述DNA分子的电泳分离原理和影响因素,提出改进措施和展望04电泳分离的优缺点电泳分离的优点高灵敏度电泳分离技术结合了荧光检测、质谱检测等手段,提高了检测的灵敏度,高分辨率能够检测出低浓度的组分电泳分离技术能够实现高分辨率分离,对于复杂样品中的组分能够进行有效的应用范围广分离电泳分离技术适用于蛋白质、核酸、多糖等多种生物分子的分离,具有广操作简便泛的应用范围电泳分离技术操作简便,通过调整电泳参数即可实现分离效果的控制电泳分离的缺点时间长电泳分离技术需要较长时间才能完成分离,对于大规模样品的处理效率较低成本高电泳分离技术需要昂贵的仪器设备和试剂,成本较高影响因素多电泳分离效果受到多种因素的影响,如电泳缓冲液的组成、pH值、电压等,需要严格控制实验条件对样品要求高电泳分离技术对于样品的纯度和浓度有一定的要求,对于低浓度、复杂样品中的组分分离效果可能不佳电泳分离的改进方向优化电泳介质提高检测灵敏度通过研发新型的电泳介质,提高分离效果和结合新型检测手段,提高电泳分离技术的检分辨率测灵敏度发展高通量电泳技术降低成本通过发展高通量电泳技术,提高大规模样品通过优化实验条件和仪器设备,降低电泳分处理效率离技术的成本05电泳分离的实际应用案例在生物医学领域的应用核酸检测在生物医学研究中,电泳分离技术常用于核酸检测,蛋白质分离如DNA和RNA的分离、基因突变检测等电泳分离技术广泛应用于蛋白质分离,可用于蛋白质纯化、鉴定和分离不同蛋白质组分疾病诊断通过电泳分离技术,可以检测生物样本中的异常蛋白质或核酸,辅助医生进行疾病诊断在环境监测领域的应用污染物分离01电泳分离技术可用于分离环境中的污染物,如重金属离子、有机物等废水处理02通过电泳分离技术,可以去除废水中的有害物质,提高废水处理效果土壤修复03电泳分离技术也可用于土壤中污染物的分离和去除,促进土壤修复在食品工业领域的应用食品成分分析电泳分离技术可用于食品成分分析,如蛋白质、糖类和脂类的分离和鉴定食品安全检测通过电泳分离技术,可以检测食品中的有害物质和微生物污染食品添加剂检测电泳分离技术可用于食品添加剂的分离和鉴定,确保食品的安全和合规性在其他领域的应用制药工业电泳分离技术在制药工业中用于药物的分离和纯化农业领域在农业领域,电泳分离技术可用于土壤养分分析和农产品质量检测化学分析在化学分析中,电泳分离技术可用于化学物质的分离和鉴定感谢观看THANKS。