脊髓伤后脊髓组织一氧化氮合酶活性的动态变化及其意义

脊髓伤后脊髓组织一氧化氮合酶活性的动态变化及其意义材料与方法实验动物与分组健康、封闭群大鼠只，体质量（），随机分为1假手术组及根据后路压迫伤后取材的时间分为、、、、和组，

1.1sd42280±30g每组只0510203060min试剂及器材，，，、、、钙调蛋白6均购自公司，其余试剂为国产级低温离心机为日本产

1.2l-[2345-3h]-arginine dowexag50w-x8nadph品，液体闪烁仪为美国产品，超声波粉碎机为上海超声sigma armegafuge

1.0r波仪器厂产品beckmanls5000ce cps-1a方法动物模型的制备动物用戊巴比妥钠腹腔注射医学专用，取后正

1.3中切口，切除～椎板，暴露脊髓，按方法后路压迫脊髓

1.

3.11%30mg/kg（）假手术组仅行脊髓暴露而不致伤t810nystrom

[2]脊髓标本的采集按分组时间要求处死动物后，立即浸入冰水中，取伤段脊髓

35.0g/10min或相应部位脊髓置于冰冷的缓冲液中（，），匀浆，超声粉

1.

3.2碎立即置于低温离心机中离心（）hepes20mmol/l ph

7.4检测将上述上清液加于含有、4℃15000r/min×30min、钙调蛋白的缓冲液中，为然后加

1.

3.3[3h]citrulline25ml2mmol/lnadph入（），置于恒温水浴箱中立即加

0.5mmol/lcacl210g/l50mmol/lhepes ph

7.4入含有的反应停止液中，过层析柱，于25ml[3h]l-arginine25mci/25ml24℃30min液闪仪中测定的放射活性2mmol/ledta20mmol/lhepes dowexag蛋白含量的测定采用改良法测定蛋白含量beckman[3h]-citrulline活性表示活性表示为每分钟每毫克蛋白形成的的量

1.

3.4lowry

[3]创伤后各时相活性以与假手术组相比而得的相对值表示

1.

3.5nos nos[3h]-citrulline统计学处理采用检验和检验进行统计学处理nos结果

1.

3.6f t脊髓压迫伤后即刻，伤段脊髓组织活性升高到正常脊髓的倍，有显著差2异（nos

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