还剩6页未读,继续阅读
文本内容:
《仪使用要点》HPLC课件PPT在这个课件中,我们将介绍仪器的基本知识和使用要点从什么是HPLC仪器以及它的工作原理开始,到分析中需要注意的组成部分、分离柱HPLC的选择和使用、常见分离技术,以及操作步骤和故障排除方法仪器是什么?HPLC(高效液相色谱)是一种常用的分离技术,通过液相作为移动相,在HPLC色谱柱中对混合样品进行分离和分析它在药物、食品、环境等领域有广泛应用仪器的工作原理HPLC仪器通过一个高压系统,将移动相推动通过色谱柱,样品中的化合物被不同的分离机理在柱中分离,并HPLC通过检测器进行检测和定量仪器的组成部分HPLC高压泵进样器色谱柱提供恒定的流速和压力,将将样品引入柱子,可以手动选择合适的柱子进行分离,溶剂推动经过柱子或自动进行不同种类的柱子可以实现不同的分离机理分离柱的选择和使用HPLC选择合适的柱子柱子的准备和保养根据分析目标和样品性质选择合适的柱子,如反相在使用前要进行柱子的准备工作,并定期保养柱子柱、离子交换柱等以确保分离效果和柱寿命常见分离技术HPLC反相色谱通过非极性固定相和极性溶剂进行分离,常用于疏水性化合物
1.的分析离子交换色谱通过固定相上的离子交换基团与溶液中离子间的相互作用
2.进行分离,常用于离子性化合物的分析手性色谱通过手性固定相分离不对称分子,常用于药物中手性异构体的
3.分析尺寸排除色谱通过使用具有不同孔径大小的固定相,从而排除分子尺寸
4.较大的化合物亲和色谱通过特定的亲和基团与目标化合物的选择性相互作用进行分离,
5.常用于生物样品的分析仪器的操作步骤HPLC准备工作
11.检查仪器的状态、准备好试剂、校准仪器HPLC样品制备
22.准备样品溶液、过滤样品、调整样品的值等pH样品进样
33.通过进样器将样品引入色谱柱过程
44.Elution设置合适的流速和梯度条件,进行样品的分离结果分析
55.通过检测器获取结果,并进行解析和定量常见的仪器故障及排除方法HPLC压力异常峰形不对称信号漂移
11.
22.
33.可能是进样器堵塞、柱子可能是流速不稳定、柱子可能是检测器的问题,可压力过高等原因,可以检老化等原因,可以调整流以进行校准或更换检测器查和清洗相应部件速或更换柱子。