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附录A(规范性)杀菌试验方法A.1方法概述将微生物悬浮液涂覆到餐饮具上,干燥后装载到消毒柜中,运行指定的消毒程序对染菌载体在程序前后的微生物残留量进行统计,计算细菌杀灭效果A.2试验菌种和器具A.
2.1试验用菌大肠杆菌CGMCC
1.90金黄色葡萄球菌StaphylococcusaureusCGMCC
1.89单核增生李斯特氏菌ListeriamonocytogenesCGMCC
1.10753A.
2.2国种活化和国,攸制备将标准试验菌株接种于斜面固体培养基上,在(37±1)°C条件下培养24h后,在5℃〜10℃下保藏(不得超过1个月),作为斜面保藏菌将斜面保藏菌转接到平板固体培养基上,在(37±1)条件下培养(24±1)h每天转接1次试验时应采用3〜5代、24h内转接的新鲜细菌培养物用接种环从新鲜培养物上刮1环〜2环新鲜细菌,加入适量
0.9%的生理盐水中,并依次做10倍梯度稀释液,选择菌液浓度为(1〜5)Xl()8cFU/mL的稀释液作为试验用菌液,按GB
4789.2的方法操作A.
2.3仪器—生化培养箱温控最大允许误差±1℃;—冷藏箱5℃〜10℃;—II级生物安全柜—压力蒸汽灭菌器—平皿、试管、移液管(最大允许误差±
0.01mL)、接种环、酒精灯等实验室常用器具A.3试验负载根据制造商声明或说明书规定,按照产品宣传可消毒的餐饮具材质,选择附录C中的一种或多种餐饮具作为负载试验前,采用干燥箱160℃2h对负载进行灭菌处理待负载温度降至37℃以下方可使用应确保器具中没有残留1次使用时的添加物不能进行高温处理的塑料餐饮具,可用75%酒精擦拭3遍,用无菌水冲洗,无菌环境下晾干A.4试验步骤A.
4.1试验样机准备试验前样机空载运行2个消毒程序A.
4.2试验过程A.
4.
2.1污染负载制备对每种负载使用量的50%进行污染如50%的负载量非整数,可进位取整每种负载涂覆菌液的量可见表A.1涂覆后在室温下静置lh待负载表面无明显流动痕迹后即可使用表A.1负载涂覆污染物用量A.
4.
2.3装载运行将涂覆污染物的负载按照试验样机的装载量进行装载,装载结束后,运行指定的消毒程序测试应在额定工作状态下进行A.
4.
2.4洗脱培养程序运行结束后,将负载取出,每件负载表面残留物用20mL无菌生理盐水洗涤,掉洗脱液中残留微生物量进行计数计算每种负载回收的残留微生物的平均数A.
4.
2.5阳性对照按照与试验组相同方法制备染菌负载2件,室温下放置与试验组测试程序相同时间后,直接回收A.5计算按下列公式A.1计算细菌杀灭效果P=lgA-lgBA.1式中P——细菌杀灭对数值;A——对照组每种负载上回收的平均微生物残留量,CFU/件;B——试验组每种负载上回收的平均微生物残留量,CFU/件附录B(规范性)长效储存试验方法方法概述将食具装载至消毒柜内,储存72h后取出,随机抽取试验负载进行表面微生物测试试验环境试验采取无菌操作技术,试验室环境应符合GB19489的要求样机运行环境温度为(23±2)℃相对湿度为(50±10)%o仪器和材料a)生化培养箱温控精度±1℃b)振荡培养箱温控精度±1℃c)二级生物安全柜d)压力蒸汽灭菌器e)冷藏箱(5〜10)℃f)移液管、培养皿等试验室常规器皿试验负载根据制造商声明或说明书规定,按照产品宣传可消毒的食具材质,选择附录C中的一种或多种食具作为负载试验前,采用干燥箱(160℃2h)对负载进行灭菌处理待负载温度降至37℃以下方可使用应确保器具中没有残留1次使用时的添加物不能进行高温处理的塑料负载,可用75%酒精擦拭3遍,用无菌水冲洗,无菌环境下晾干试验方法样机的准备样机按照说明书要求进行安装试验前样机空载运行2个消毒程序试验负载的准备1)在所用的负载表面涂覆营养肉汤(NB)涂覆量按照表A.1涂覆后在室温下静置lh待其表面无明显流动痕迹后即可2)涂覆后,将所有负载在以
2.5L/min流速的自来水冲洗1min;3)在无菌环境下沥干水分,装载至样机中装载运行将沥干水分的试验负载按照待测样机的装载量进行装载,装载结束后,运行指定的消毒程序洗脱培养程序运行结束72h后,从试验样机的不同位置随机抽取试验负载,采集的试验负载量不低于额定容量的10%采集试验负载包含所有材质用无菌生理盐水以20mL/件的量冲洗采集的负载表面,将洗脱液按照GB
4789.2进行菌落计数附录c规范性餐饮具规格数量餐饮具规格数量见表C.l.表C.1餐饮具规格数量序号负载名称菌液用量/mL1儿童碗12奶瓶23奶嘴
0.54儿童勺
0.25儿童筷
0.26儿童盘17儿童餐盘/每个食物槽18佐料碟
0.5序号食具名称尺寸mm材质单个质量g1儿童碗0103x52塑料PP1752儿童碗135x115x45竹纤维623儿童碗
①110x67木质1254儿童碗
①115x45小麦秸秆220mL5儿童碗0110x50硅胶2106奶瓶/奶嘴445±5x140±5玻璃/硅胶
190.0±
5.07儿童勺140不锈钢
40.0+
8.08儿童盘P170X30密胺树脂MF1319儿童盘P155X10甘蔗纤维/10儿童筷183稻壳5111儿童餐盘25X20不锈钢22012佐料碟p96x23强化瓷
90.0±
10.0。