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PCR实验的污染源PCR实验室又叫基因扩增实验室PCR是聚合酶链式反应PolymeraseChainReaction的简称是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别在实际实验过程中有哪些问题需要注意的,一起来看看吧~PCR实验室的污染来源有哪些.样本间交叉感染收集样本的容器被污染或样本密封不严导致外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染.实验试剂污染主要是在PCR组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染加样过程中,因为PCR试剂对温度十分敏感,需要通过冰浴使得PCR试剂和PCR板/管处于1C但这个过程也充满污染风险.扩增产物污染大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖,这是PCR反应中最主要、最常见的污染问题因为PCR产物拷贝量大,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可形成假阳性.克隆质粒污染作为阳性质控品的克隆质粒外溢PCR实验室污染应急处理方法,小贴士!
1、若核酸样本溢出:立即用布或纸巾覆盖,由外围向中心倾倒10%的次氯酸消毒剂,约30分钟后,清除污染物品,再用次氯酸消毒剂擦拭,并用75%酒精喷洒,移动紫外车定点照射1小时.其他不明情况污染
1、暂停所有实验操作;
2、清理实验室内所有物品,寻找污染来源;
3、加大实验室的通风;
4、对实验室内所有表面(台面、地面及墙面)进行消毒;
5、75%酒精空中喷雾;
6、开启紫外消毒装置,延长紫外照射时间(4小时以上);
7、以上措施每日进行,直至污染消除;用新试剂及确认无污染的器材进行原污染项目的试剂空白检测,连续3次均阴性后方可进行常规检测为了自己要高度重视这些「PCR实验室」内的职业危害充满负压、噪音、病毒的PCR实验室到底有没有职业危害这个问题,小编还是决定要抛开专业说专业负压实验室,是检测病毒样本的最基本条件所谓负压,就是在实验室内气压比实验室外环境的正常气压要低,在实验室内外产生一定的压力差,从而控制气体流动的方向,保证气流从实验室外流向实验室内,负压能确保室内空气不会泄漏出去造成污染,可以有效的保护环境但是负压实验室环境会不会对人体会造成伤害呢?搜遍现有的文献资料,所有论点都是强调对环境的安全性,对于在负压环境下的人有没有影响这个问题,并没有一篇文章提及,更别说进行科学详细的论述但没提及的事情不等于不存在,或许这是从业人员面临的一种新型的职业危害,有些危害可能已经出现了,可有些危害一时还不易被工作人员察觉,但实际从事该工作的工作者应当给予重视。