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鲸孕激素/孕酮PROGELISA检测试剂盒说明书产品名称鲸孕激素/孕酮PROGELISA检测试剂盒规格:96T/48T保存;2-8℃检测目的:用于检测血浆血清及相关液体等样本例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.检测种属:大鼠、小鼠、月豕鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物试剂盒组成及试剂配制.酶联板Assayplate:一块96孔.标准品Standard瓶冻干品.样品稀释液SampleDiluent1义20ml/瓶.生物素标记抗体稀释液Biotin-antibodyDiluent:】X10ml/瓶.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液HRP.avidinDiluent:lX10ml/瓶.生物素标记抗体Biotin-antibody:lX120口1/瓶1:
100.辣根过氧化物酶标记亲和素HRP-avidin:lX120u1/瓶1:1008底物溶液TMBSubstrate:1义10ml/瓶.浓洗涤液WashBuffer:lX20ml/瓶,使用时每瓶用蒸储水稀释25倍.终止液StopSolution1X10ml/瓶2NH2so4样品收集、处理及保存方法1血清--操作过程中避免任何细胞刺激使用不含热原和内毒素的试管收集血液后1000Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离2血浆--EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测lOOOXg离心30分钟去除颗粒3细胞上清液一1000Xg离心10分钟去除颗粒和聚合物4组织匀浆一--将组织加入适量生理盐水捣碎1000Xg离心10分钟,取上清液5保存一一如果样品不立即使用,应将其分成小部分・70℃保存,避免反复冷冻尽可能的不要使用溶血或血如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤不要在37c或更高的温度加热解冻应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻操作步骤.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释.力口样:分别设空白孔空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同、标准孔、待测样品孔在酶标包被板上标准品准确加样50b待测样品孔中先加样品稀释液40UI然后再加待测样品10山样品终稀释度为5倍加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁轻轻晃动混匀.温育:用封板膜封板后置37c温育30分钟.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水30倍稀释后备用.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次拍干.加酶:每孔加入酶标试剂50口1空白孔除外.温育:操作同
30.洗涤:操作同5o.显色:每孔先加入显色剂A50UI再加入显色剂B50b轻轻震荡混匀37℃避光显色15分钟..终止:每孔加终止液50UI终止反应(此时蓝色立转黄色).测定:以空白空调零450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)测定应在加终止液后15分钟以内进行使用注意事项.试剂盒使用前请保存在2-8℃复溶后的标准品若未用完,请废弃.微量试剂运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖因此使用前请1000转/分离心1分钟以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶属于正常现象,微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加热温度不要超过50C)使用时洗涤液应为室温.不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)5充分轻微混匀对反应结果尤为重要zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)如无微量振荡器,可在反应孵育前手工轻轻混匀.在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测.试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试验结果.试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作特别是检测血液或者其他体液标本时请按国家生物试验室安全防护条列执行本公司产品仅用于科研。