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链霉亲合素(AB002)产品说明链霉亲和素(streptavidin)是一种源自于阿维丁链霉菌(Streptomycesavid/T)的蛋白质,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子链霉亲和素与生物素的结合力极强,其解离常数约为1014M这一特质使得链箧亲和素•生物素系统广泛应用于荧光显微镜术、免疫电镜、流式细胞分析、Western杂交、ELISA检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域与来源于鸡蛋清的亲和素相比,链霉亲和素不含糖基修饰,等电点接近生理pH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比本公司生产的链霉亲和素(编号AB002)是经基因工程改造的重组核心链霉亲和素,不含天然链霉亲和素N-末端及C-末端多肽片段,有效避免了这些末端多肽对生物素结合的空间位阻其分子量为
52.3kD理论活性为
18.7Units/mg1unit定义为结合1川牛.物素所需链寄亲和素的量(单位mg).AB编号AB002-1AB002-5AB002-10AB002-100规格1毫克,5毫克,10亳克,100毫克W性状冻干粉,含微量磷酸盐产品来源重组蛋白,大肠杆菌表达分子量
52.3kD消光系数lmg/ml浓度时,280nm光吸收A280=
3.2⑶纯度SDS-PAGE检测299%Aboiled活性^17Units/mg(生物素滴定法⑶测定)_.*保存条件-20久干燥保存,活性至少保持2年B:non-boiled溶解方法以纯水溶解冻干粉至5-10mg/ml浓度,分装成适宜体积,-20久或-8(TC冻存避免反复冻溶,其活性至少可保持半•年如欲在4℃下保存溶液,可添加适量杀菌剂(如
0.05%整氮钠)以避免微牛.物牛.长,并尽快用完链霉亲和素在高浓度时、冻干过程中或反复冻溶条件下易形成难溶的聚集体,如见溶液略呈浑浊,可经16000g离心5分钟去除不溶物不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用定量方法链霉亲和素是一种高度稳定的蛋白质,可抵抗蛋白的消化、极端pH和温度、以及较高浓度的变性剂和去污剂相应的,以常用蛋白质浓度测定方法如Lowry法、Bradford法和Biuret法等测定链霉亲和素浓度时,所得结果通常显著低于其真实浓度推荐采用280nm光吸收值测定其浓度参考文献SuterM.etalIsolationandCharacterizationofHighlyPurifiedStreptavidinObtainedinaTwo-stepPurificationProcedurefromStreptomycesavidiniiGrowninaSyntheticMedium.J.Immunol.Meth.1988113:83-91GreenN.M.SpectroscopicEvidencefortheParticipationofTryptophanResiduesintheBindingofBiotinbyAvidin.Biochim.Biophys.Acta196259:244-246链霉亲合素(AB002)产品说明链寄亲和素(streptavidin)是一种源自于阿维丁链霉菌(Streptomycesavidinii)的蛋白质,由四个相同的亚基组成,每个亚基可结合一个生物素分子链毒亲和素与生物素的结合力极强,其解离常数约为IOM这一特质使得链霉亲和素-生物素系统广泛应用于荧光显微镜术、免疫电镜、流式细胞分析、Western杂交、EUSA检测等传统生物学技术,以及生物芯片和纳米生物学等现代前沿研究领域与来源于鸡蛋清的亲和素相比,链较亲和素不含糖基修饰,等电点接近生理pH值,因而非特异性吸附显著低于前者,可提供更高的检测信噪比本公司生产的链霉亲和素(编号AB002)是经基因工程改造的重组核心链寄亲和素,不含天然链霉亲和素N-末端及C-末端多肽片段,有效避免了这些末端多肽对生物素结合的空间位阻其分子量为
52.3kD理论活性为
18.7Units/mgo1unit定义为结合1pg生物素所需链霉亲和素的量(单位mg)AB编号AB002-1AB002-5AB002-10AB002-100规格1亳克,5亳克,10毫克,100亳克W性状冻干粉,含微量磷酸盐产品来源重组蛋白,大肠杆菌表达分子量
52.3kD消光系数lmg/ml浓度时,280nm光吸收A280=
3.2⑴纯度sds-page检测299%a-boiled活性^17Units/mg(生物素滴定法⑵测定)一■保存条件-20久干燥保存,活性至少保持2年B:non-boiled溶解方法以纯水溶解冻干粉至5-10mg/ml浓度分装成适宜体积,-20第或-80式冻存避免反复冻溶,其活性至少可保持半年如欲在4℃下保存溶液,可添加适量杀菌剂(如
0.05%叠氮钠)以避免微生物生长,并尽快用完链将亲和素在高浓度时、冻干过程中或反复冻溶条件下易形成难溶的聚集体,如见溶液略呈浑浊,可经16000g离心5分钟去除不溶物不溶物含量很少,不影响产品有效成分的含量及使用定量方法链需亲和素是一种高度稔定的蛋白质,可抵抗蛋白酶消化、极端pH和温度、以及较高浓度的变性剂和去污剂相应的,以常用蛋白质浓度测定方法如Lowry法、Bradford法和Biuret法等测定链霉亲和素浓度时,所得结果通常显著低于其真实浓度推荐采用280nm光吸收值测定其浓度参考文献SuterM.etal..IsolationandCharacterizationofHighlyPurifiedStreptavidinObtainedinaTwo-stepPurificationProcedurefromStreptomycesavidiniiGrowninaSyntheticMedium.J.Immunol.Meth.1988113:83-91GreenN.M.SpectroscopicEvidencefortheParticipationofTryptophanResiduesintheBindingofBiotinbyAvidin.Biochim.Biophys.Acta196259:244-246。