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文本内容:
化学试剂配制程序.目的保证实验中用到的各种溶液符合实验要求.适用范围PCR室常用溶液4%NaOH溶液、次氯酸钠消毒剂.职责PCR检验实验室工作人员共同遵守、相互监督.程序
4.1用具干燥洁净的250ml量桶一只,1000ml量桶一只,1000ml烧杯一只,三角烧瓶两只,天平一架,2000ml广口瓶各一只
4.2配制4%NaOH溶液:
4.
2.1用天平称取4克分析纯的NaOH固体,置于一只三角烧瓶中
4.
2.2用250ml量桶准确取100ml水,缓缓注入盛放NaOH固体的三角烧瓶中
4.
2.3摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解
2.4然后缓缓倒入广口瓶中密封保存备用
4.3配制消毒剂
4.
3.1一般桌面、器具和地面的消毒只要使有效氯达到500nig/L即可达到消毒作用
4.
3.2消毒剂为颗粒状(100片/瓶),如配制一升的消毒剂溶液,则取1片,倒入容器中,缓缓加入1000ml水充分溶解,备用
4.
3.3如需加大消毒力度,则有效氯浓度加大化学试剂的保存和使用.目的依照实验室能规范使用化学试剂,保证实验质量及安全.适用范围PCR实验室工作人员及来此从事科研工作人员.职责临床PCR检验实验室工作人员共同遵守、相互督促.内容化学试剂指PCR检测及防止污染所需的,如乙醇、NaOH、次氯酸钠等试剂所有的化学试剂存放于试剂准备区化学试剂柜中备用备用化学试剂须保持标识完整储存条件需避光、通气、防潮储存温度以常温5-20℃,相对湿度30%-70%为宜工作试剂的配制、稀释过程在试剂准备区完成配制好的试剂标明试剂名、试剂浓度、配制时间后使用每月清点一次试剂,发现试剂存量不足时,及时领用或申请采购发现有试剂过期或明显变质时要立即报废,并将报废试剂妥善处理PCR室常用化学试剂均可置于避光、阴凉、干燥处保存实验中常用到的一些化学试剂则根据要求保存于不同环境PCR试剂按说明书要求贮存于相应温度试剂配制过程中需打开风机、配戴口罩及手套使用后注意保持试剂瓶的密闭状态实验耗材的质量性能检测.目的为保证耗材的使用质量不会影响检测工作的正常进行需对每批新领耗材进行质检,质检合格才能使用.适用范围PCR核酸扩增荧光检测实验室常用耗材,包括
1.5ml离心管、带滤芯吸头.职责PCR室在岗人员.内容实验耗材在目测合格后基本上都可以初步通过验收如果在目测不合格或目测合格后频繁出现爆管、堵塞、漏液、漏气等情况下,再由实验人员按下列方法进行实验检测
4.1检测
1.5ml离心管
4.
1.1离心管的密封性质检方法
4.
1.
1.1每批随机抽样离心管10个,将离心管置于100C干浴锅中20分钟后取出,如发现有爆开情况发生,即认为该批离心管不符合实验室实验要求,做退货处理
4.
1.
1.2再将这20个离心管加500UL生理盐水后15000rpm/min离心20分钟,如发现有管盖爆开或漏液情况发生,即认为该批离心管不符合本实验室实验要求,作退货处理
4.
1.2离心管的PCR抑制物质检方法采用新批次离心管,做空白对照、阴性对照、阳性对照及阳性梯度10110\10\107各两个标本,与上批次耗材作对比,观察新耗材是否抑制Taq酶活性看定量结果是否在SD范围内,如超限,视为不合格
4.
1.3经上述检测未发现不合格情况后,即启用该批耗材
4.2检测带滤芯的吸头
4.
2.1目测检查吸头有无畸形、坏损吸头需薄壁,嘴口尖、无毛刺,表面光滑
4.
2.2实验检测每批随机抽样吸头10个用于实验检测
4.
2.3用适配加样器配合吸取适量液体,看有无吸孔堵塞、漏气现象发生,吸嘴与吸嘴套筒密封是否完好在排除移液器因数后,如有异常发现,即认为该批吸头不符合本实验室实验要求,作退货处理
4.
2.4滤芯性能检测首先准备一瓶红墨水,如果吸头的最大体积为200UL则将加样器吸取体积调至210UL再套上吸头后吸取红墨水,如果吸头质量好,则红墨水不应出现在滤芯之上否则说明滤芯不严,作退货处理
4.
2.5经上述检测未发现不合格情况后即启用该批耗材
5.引用表格《耗材验收与质检记录表》试剂盒的质量性能检测.目的保证PCR检测所使用的试剂质量良好.适用范围PCR实验室试剂的质检操作.职责PCR室在岗人员.内容对已购买的三证齐全的新批号试剂进行质检,运输过程试剂冷藏,货箱内有致冷冰袋检查试剂内外包装,核对试剂品种和数量外包装检查包装应完整无损无污,标识清楚--厂家名称、品名、批准文号、生产日期、有效期等内包装检查内包装是否有破损,泄漏,内容物是否齐全,是否有相应的使用说明书等检查合格后及时将试剂按照保存要求的温度放入冰箱保存将上述检测核对情况在记录本上记录在前批次试剂存量尚能维持常规实验一周时,按如下要求对新批号试剂进行测定性能检验对PCR试剂盒测定性能的质检采用室内质控物来进行,每次试剂盒质检时用阴性对照、阳性对照、定量标准品(
10、IO、10%107)及临床标本一起检测,可判断试剂盒质量.5判断及处理试剂盒检测阴性对照无扩增,阳性标准品的标准曲线之斜率(一
3.2一—
3.7)截距(>40)相关系数2—
0.99室内质控在控,且定量标准品的Ct值与上批号试剂相比无显著差异,表明该批试剂良好,可以投入临床使用.引用的表格《试剂验收与质检记录表》文山市人民医院检验科PCR室试剂标准操作规程化学试剂的保存和使用文件编号PCR-SJ-002生效日期2015-01-28文件版本
1.
1.0文件页码2/5编写人张水仙审核人张水仙批准人杨荣征文山市人民医院检验科PCR室试剂标准操作规程实验耗材的质量性能检测文件编号PCR-SJ-003生效日期2015-01-28文件版本
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1.0文件页码3/5编写人张水仙审核人张水仙批准人杨荣征文山市人民医院检验科PCR室试剂标准操作规程实验耗材的质量性能检测文件编号PCR-SJ-003生效日期2015-01-28文件版本
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1.0文件页码4/5编写人张水仙审核人张水仙批准人杨荣征编写人张水仙审核人张水仙批准人杨荣征。