超氧化物歧化酶SOD标准曲线测定试剂盒产品说明书中文版主要用途

超氧化物歧化酶SOD标准曲线测定试剂盒产品说明书中文版主要用途超氧化物歧化腑SuperoxideismutaseSOD标准曲线测定试剂是一种旨在通过比色测定高度可溶性的四哩盐在超氧化物阴离子的还原作用下产生的水溶性甲攒染料所获得的吸光值，来对应构建已知超氧化物岐化施活性单位标准曲线的权威而羟典的技术方法该技术经过精心研制、成功实验证明的其适用于各种细胞和组织样品中超氧化物歧化的实际活性单位计算的参照依据产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定技术背景超氧化物岐化酶SOD是体内的重要金属酶抗氧化剂，催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢H2O2和分子氧02超氧化物歧化酶活性检测试剂使用高度水溶性的四嗖盐:WST-l[2-4-【odophcnyD-3-4-nitrophenyi-5-

2.4-disulfophenyl-2H-tetrazoliummonosodiumsalt；2-4-碘苯基-3-4-硝基苯基〉-5-

24.笨二横酸.2H-四啜单钠盐]WST-I灵敏度高，氧化态的吸光度低，呈浅黄色，水溶性好，可以100%被SOD抑制，检测不受pH影响，背景噪音低WST-I被02-还原呈现深黄色的还原率和黄噫吟氧化酶的活性成线性关系，该反应能被超氧化物岐化酶SOD抑制完全抑制，WST-1呈现无色利用SOD能抑制WST-1和6的氧化还原能力来测定SOD的活性波长为45nm的比色分析产品内容产品说明书保存方式保存在-20C冰箱里染色液ReagentB避免光照，有效保证6月用户自备

1.5亳升离心管用于反应液配制的容器

2.2毫升离心管用于反应液配制的容器幅标板或比色皿用于比色分析的容器的标仪或分光光度仪用于比色分析实验步骤实验开始前，将一20C冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化，然后移出2毫升反应液ReagentA到新的

2.2型升离心管，加入10微升染色液ReagentB轻柔混匀后，置于暗室里，标记为染色工作液然后移出200微升稀释液Reagent到新的

1.5亮升离心管，加入5微升催化液ReagentC轻柔混匀后，置于冰槽里，标记为催化工作液然后进行下列操作

一、二倍法系列稀释.设定好酶标仪并预热波长450nm.取出待测的标准液ReagentF置于冰槽里.准备1个96孔板，做好1至5号标记，置于冰槽里.按下列顺序依次加入下列反应液到96孔板的标记样品孔里1分别移取20微升稀释液Reagent到96孔板的2至5号孔里2移取40微升标准液ReagentF到96孔板的1号孔里3用200微升枪头抽去20微升1号孔里的标准液ReagentF到96孔板的2号孔里4用2X微升枪头上下抽吸混匀2号孔5用200微升枪头抽去20微升2号孔里含有标准液ReagentF的稀释液到96孔板的3号孔里6用200微升枪头上下抽吸混匀3号孔7用200微升枪头抽去20微升3号孔里含有标准液ReagentF的稀释液到96孔板的4号孔里8用200微升枪头抽去20微升4号孔里含有标准液ReagentF的稀释液，扔掉SOD实际浓度见下表

二、建立反应体系.分别加入200微升含有反应液ReagentA和染色液ReagentB的染色工作液到96孔板的1至5号孔里.分别加入20微升含有催化液ReagentC和稀释液Reagent的催化工作液到96孔板的1至10号孔里

三、标准样品测定.轻轻摇动96孔板，混匀反应液.放进37℃培养箱孵育20分钟，避免光照.即刻放进的标仪检测，波长为450nm

四、构建SOD标准曲线.横座标x轴为每毫升SOD单位浓度.纵坐标y轴为标准样品读数吸光单位OD值.根据测得数据构建曲线注意事项.本产品为5次操作.操作时，须戴手套.操作时，须在4c下进行.染色液ReagentB为浅黄色如果有结晶析出，放进37c温育数分钟即可染色液ReagentB一旦被还原，呈现可见黄色或深黄色；如果含有SOD则会呈现为无色.孵育时，避免光照.孵育后即刻比色测定.样品SOD实际活性单位定义每亳克样品蛋白或每亳升样品含有X单位SOD量.标准液ReagentF的活性单位定义为25C温度，pH

7.8的条件下，抑制50%在黄噪吟氧化酶参与的反应系统中，WST-1和OT之间的氧化还原能力.本公司提供系列超氧化物歧化施分析试剂产品质量标准.本产品经鉴定性能稳定.本产品经鉴定检测敏感管号稀释液Reagent标准液ReagentFSOD浓度单位/毫升10微升40微升12220微升20微升1号管6320微升20微升2号管3420微升20微升3号管

1.5520微升00。