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课后定时检测案43细胞工程I基础巩固练]——学业水平
一、二考点一植物的组织培养.下图是某组织培养过程的简图下列有关说法,正确的是()花粉粒旦>愈伤组织且胚状体3植株A.花药离体培养的条件与种子萌发的条件完全相同B.若花粉粒核中有两个或多个染色体组,则所得植株为二倍体或多倍体C.
②③过程都是细胞分化的过程,因此起作用的激素只有生长素D.该过程体现了植物细胞的全能性.(多选)“白菜一甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点下图是“白菜一甘蓝”的杂交过程示意图以下说法正确的是()汗蓝细胞原生质体BA.除去细胞壁形成原生质体,可运用的酶是纤维素酶和果胶酶B.通常诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG诱导和灭活的病毒诱导C.杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D.从愈伤组织形成“白菜一甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程考点二动物的细胞培养与体细胞克隆细胞融合与单克隆抗体.下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是()A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程中少数细胞的基因型会发生改变C.二倍体细胞的传代培养次数通常是有限的D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养.下图为单克隆抗体制备过程示意图,图中X、Y细胞分别是()T淋巴细胞、骨髓瘤细胞T淋巴细胞、杂交瘤细胞B淋巴细胞、骨髓瘤细胞B淋巴细胞、杂交瘤细胞.[2021・山东师大附中高三一模]下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述错误的是()注射B淋巴专一抗甲L小鼠__>细胞]融合7选择培养丁体检测力骨髓L乙>丙—>T瘤细胞A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法可诱导细胞融合获得乙C.用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长D.丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁[提能强化练]——学业水平
三、四.[
2021.汾湖高级中学反馈测试]人体感染新冠病毒后,机体会产生多种特异性抗体我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因的相关序列,构建表达载体并在相应系统中表达,可制备出全人源单克隆抗体以下表述错误的是()A.该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测B.在该单抗制备过程中利用了基因工程技术C.该单抗可与新冠病毒相应蛋白特异性结合D.可用抗原一抗体反应检测抗体基因表达产物.(多选)下列关于动物细胞工程的叙述,不正确的是()A.用胰蛋白酶处理动物组织后,可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液.少数细胞在连续培养50代后可获得不死性,是某些基因选择性表达的结果C.根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性D.PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞,经动物细胞培养能得到优良动物个体
8.(多选)[2021•江苏省扬州中学高三检测]下图是利用甲、乙两种植物各自的优势,通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图下列相关叙述中,正确的是)甲植物细胞\a用钠盐浓度为
0.6%的dy川c—目的植株固体培养基培养选择A.进行a处理时能用胰蛋白酶B.b是诱导融合后得到的杂种细胞C.c是培养后得到的具有耐盐性状的幼芽D.进行d选择时,要将植株种在高盐环境中[大题冲关练]——综合创新•求突破.[经典高考]甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质为了改善黄瓜的品质,科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞,得到了转基因植株回答下列问题⑴用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,选用这种叶片的理由是
(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白,则表明该重组质粒中已转移到植物细胞中且能够表达;用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交,发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为11则说明甜蛋白基因已经整合到(填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”)中
(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产,若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用作为外植体进行组织培养
(4)通常,基因工程操作主要有4个步骤,即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定因此,基因工程的含义可概括为.[2021•江苏省扬州中学高三检测]面对2019新型冠状病毒在全球的肆虐,包括我国在内的各国都在想方设法积极应对下图为科研人员研发冠状病毒疫苗的几种技术思路1途径I和n都需要通过动物细胞培养获得足够数量的病毒株在动物细胞培养中,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是与5%二氧化碳的混合气体,二氧化碳的主要作用是o途径I与途径n相比,生产的疫苗安全性更高的是途径o2途径m中,过程
①的操作需要酶途径m中所示技术的核心是用图中数字作答3途径W生产的DNA疫苗在动物细胞中表达引起机体免疫应答与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为mRNA不需要进入,无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险,且易被水解,不会遗传给子细胞4该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成,为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的序列,通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造.[
2021.河南省洛阳市高三统考]草莓营养价值高且有保健功效,但却容易受到病毒的感染科学家常采用两种方法培育新品种其一,培育无病毒组培苗;其二,将草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因SMYELV—CP导入草莓基因组中培育出转基因抗病毒草莓请分析回答下列问题1若培育无病毒组培苗,通常取植株的进行组织培养2利用PCR技术扩增目的基因SMYELV-CP其前提是,以便根据这一序列合成引物为维持pH基本不变,需要在PCR反应体系中加入o⑶重组载体上应含有特定的填“复制原点”“启动子”或“标记基因”,它能被受体细胞的所识别,以便于催化转录过程为检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,该技术的具体做法是.[2020•广东省汕尾市城区统考]细胞融合技术已在农业、工业、医药等领域取得了开创性的研究成果,且应用领域在不断扩大请回答下列有关细胞融合技术及其应用的问题:1与植物细胞融合相比,动物细胞融合特有的方法是o2在植物体细胞杂交过程中,要先去除细胞壁,以获得原生质体原生质体融合的过程不能在低渗溶液中进行,目的是防止植物细胞融合成功的标志是o细胞融合打破了不同物种之间的,使远缘杂交成为可能3制备单克隆抗体时通常选择骨髓瘤细胞和免疫的B淋巴细胞进行融合,原因之一是骨髓瘤细胞具有的特点,细胞融合后要置于选择培养基上进行选择培养,以去除4单克隆抗体可用于诊断人体是否携带某种病毒,其诊断原理是.[
2021.云南省文山州高.三月教学质量检测]动物细胞工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有着广泛的用途请回答下列问题1动物细胞工程技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、、生产单克隆抗体等,其中是其他动物细胞工程技术的基础2用幼龄动物的组织进行动物细胞培养时,需要先对动物组织块进行处理,再用处理分散成单个细胞3在进行动物细胞培养时,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的O4目前用哺乳动物体细胞克隆动物,实际上是通过核移植来实现的,哺乳动物核移植可以分为和O5诱导动物细胞融合的方法有、、电激等利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制造开辟了新途径.[2021•浙江金华东阳中学高三检测]西瓜花叶病毒WMV主要侵害西瓜、甜瓜等各种瓜类作物,造成瓜类发病或减产科研人员利用单克隆技术制备出抗WMV的特异性单抗,并以其为核心建立能快速有效地检测WMV的方法,可用于田间西瓜花叶病毒病的诊断和检测回答下列问题1以提纯的WMV病毒作为抗原,对小鼠进行免疫,常用化学诱导剂将小鼠的和骨髓瘤细胞进行细胞融合2可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选,需要淘汰的融合细胞为随后将选出的细胞多倍稀释,接种在特定细胞培养板上,使这些单细胞克隆生长,最终选出能稳定分泌的杂交瘤细胞3将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水,一段时间后收集并纯化腹水,进行抗体效价和类型的测定也可对克隆的杂交瘤细胞进行更能持久地得到单一的抗体单抗比一般抗体优越得多,原因是4抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针,利用方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物,进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因,该目的基因能否在其他植物体内稳定存在并遗传的关键是课后定时检测案
43.解析花药离体培养所需条件要求更高,需用MS培养基,另外还需要适宜的pH、温度和光照,而种子萌发需要适宜的温度、水分等,A错误;花粉培养形成的植株称为单倍体,B错误;在细胞分化过程中有多种激素起作用,其中起主要作用的是细胞分裂素和生长素,C错误;在该过程中,单个细胞最终培养成了植株,这体现了植物细胞的全能性,D正确答案D.解析除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶;诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒;杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁;从愈伤组织形成“白菜一甘蓝”植物体属于再分化过程答案AC.解析动物细胞在培养过程中有接触抑制现象,细胞在培养瓶中会贴壁生长,最终会形成一层细胞,相互接触后停止生长;克隆培养法培养的过程中,仅有极少数细胞的基因型会发生改变;二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了;恶性增殖细胞系的细胞具有不死性,可以进行传代培养答案A.解析制备单克隆抗体的细胞来源于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞据图分析,给小鼠注射抗原,使得小鼠产生免疫反应,形成能产生抗体的B淋巴细胞,因此X是B淋巴细胞Y是体外培养的骨髓瘤细胞答案C.解析图中小鼠注射甲,产生能分泌特异性抗体的B淋巴细胞,则甲属于抗原,A正确;利用聚乙二醇化学法、灭活的病毒生物法和电激物理法可诱导细胞融合获得杂种细胞,B正确;用特定的选择培养基对乙筛选,融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长,只有杂交瘤细胞能生长,C错误;杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备单克隆抗体,D正确答案c.解析由分析可知,该单抗是蛋白质,不能直接用于新冠病毒的核酸检测,A错误;由题“针对病毒表面抗原的抗体基因的相关序列,构建表达载体并在相应系统中表达,制备出全人源单克隆抗体”可知,在该单抗制备过程中利用了基因工程技术,B正确;针对新冠病毒表面抗原制备出的单抗,可与新冠病毒相应蛋白特异性结合,C正确;抗体基因表达产物检测的方法是采用抗原一抗体杂交反应,若呈阳性,则说明已翻译出相应的蛋白质,D正确答案A.解析用胰蛋白酶处理动物组织后,可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液,A正确;少数细胞在连续培养50代后可获得不死性,这是某些基因突变的结果,B错误;基因突变在高倍镜下是观察不到的,C错误;由于动物细胞的全能性受到限制,动物细胞融合形成的杂种细胞不能培育成动物,D错误答案BCD.解析a为果胶酶和纤维素酶处理得到原生质体,A错误;b是甲乙融合的杂交细胞B正确;c是培养后得到的耐盐的幼芽,C正确;进行d选择时需在高盐环境中进行,D正确答案BCD.解析
(1)用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞
(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白,则表明该重组质粒中甜蛋白基因已转移到植物细胞中且能够表达;用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交,发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1:1则说明甜蛋白基因已经整合到核基因组中
(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产,若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用茎尖作为外植体进行组织培养
(4)基因工程的含义可概括为按照人们的愿望进行设计,并通过体外重组和转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出符合人们需要的新生物类型答案
(1)受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞
(2)甜蛋白基因核基因组
(3)茎尖
(4)按照人们的愿望进行设计,并通过体外重组和转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出符合人们需要的新生物类型.解析
(1)动物细胞培养需要一定的气体条件,即95%空气与5%二氧化碳的混合气体;二氧化碳的作用主要是维持培养液的pH途径I与途径n相比,生产的疫苗安全性更高的是途径n
(2)途径ni中,
①为逆转录过程,需要逆转录酶途径【n采用的是基因工程技术,该技术的核心是
③基因表达载体的构建
(3)与DNA疫苗相比,mRNA疫苗的安全性更有优势,这是因为mRNA不需要进入细胞核,无整合到宿主细胞染色体基因组中的风险且易被RNA(水解)酶水解,不会遗传给子细胞
(4)该病毒表面蛋白A为主要抗原,由病毒的A基因控制合成,为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的氨基酸序列,通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造这种人源单克隆抗体属于蛋白质工程的产物答案⑴95%空气维持培养液的pHII
(2)逆转录
③
(3)细胞核RNA(水解)酶⑷氨基酸.解析
(1)植物的茎尖分生区细胞几乎不含病毒,因此培育无病毒组培苗通常采用植株茎尖分生区进行组织培养
(2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列,以便根据这一序列合成引物为维持pH基本不变,需要在PCR反应体系中加入缓冲液
(3)为保证目的基因的表达,重组载体上应含有特定的启动子,它能被受体细胞的RNA聚合酶所识别,以便于催化转录过程为检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,该技术的具体做法是从转基因生物中提取mRNA用标记的目的基因作探针与mRNA杂交,如果显示出杂交带,则表明目的基因转录出了mRNA答案
(1)茎尖
(2)要有一段已知目的基因的核甘酸序列缓冲液
(3)启动子RNA聚合酶从转基因生物中提取mRNA用标记的目的基因作探针与mRNA杂交如果显示出杂交带,则表明目的基因转录出了mRNA.解析
(1)与植物细胞融合相比,动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导融合
(2)在植物体细胞杂交过程中,要先去除细胞壁,以获得原生质体原生质体融合的过程不能在低渗溶液中进行,目的是防止原生质体吸水涨破植物细胞融合成功的标志是形成新的细胞壁细胞融合打破了不同物种之间的生殖隔离,使远缘杂交成为可能
(3)制备单克隆抗体时通常选择骨髓瘤细胞和免疫的B淋巴细胞进行融合,原因之一是骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点,细胞融合后要置于选择培养基上进行选择培养,以去除非杂交瘤细胞
(4)单克隆抗体可用于诊断人体是否携带某种病毒,其诊断原理是与相应抗原发生特异性结合答案
(1)灭活的病毒诱导
(2)原生质体吸水涨破形成新的细胞壁生殖隔离
(3)无限增殖非杂交瘤细胞
(4)与相应抗原发生特异性结合.解析
(1)动物细胞工程技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础
(2)用幼龄动物的组织进行动物细胞培养时,需要先剪碎动物组织块,再用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成单细胞悬液,然后进行培养
(3)在进行动物细胞培养过程中,经常表现为接触抑制的特征,即当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖
(4)目前用哺乳动物体细胞克隆动物,实际上是通过核移植来实现的,哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植两种类型
(5)诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物因素,即为电激、聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒等方法利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为单克隆抗体的制备提高了新途径答案
(1)动物细胞融合动物细胞培养
(2)剪碎胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)
(3)接触抑制
(4)胚胎细胞核移植体细胞核移植
(5)聚乙二醇(PEG)灭活的病毒单克隆抗体.解析
(1)以提纯的WMV病毒作为抗原,对小鼠进行免疫可用物理、化学或生物方法诱导细胞融合,常用化学诱导剂聚乙二醇将小鼠免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行细胞融合
(2)可利用选择培养基对融合细胞进行初步筛选,需要淘汰的融合细胞为B淋巴细胞一B淋巴细胞以及骨髓瘤细胞一骨髓瘤细胞,而保留融合的B淋巴细胞一瘤细胞即杂交瘤细胞;随后将选出的细胞多倍稀释,接种在特定细胞培养板上,使这些单细胞克隆生长,最终选出能稳定分泌特定抗体(抗WMV单克隆抗体)的杂交瘤细胞
(3)将选出的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔制备单抗腹水,一段时间后收集并纯化腹水,进行抗体效价和类型的测定也可对克隆的杂交瘤细胞进行体外培养,更能持久地得到单一的抗体单抗比一般抗体优越得多,其纯度高、灵敏度高、识别抗原部位专一
(4)抗WMV的单克隆抗体还可作为特异性探针,利用抗原一抗体杂交方法找出能与探针特异性结合的基因表达产物,进而实现从抗病性强的西瓜植株中获取抗病目的基因,该目的基因能否在其他植物体内稳定存在并遗传的关键是目的基因是否整合到受体细胞的染色体上答案
(1)聚乙二醇(或PEG)B淋巴细胞
(2)融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞一骨髓瘤细胞抗WMV单克隆抗体
(3)体外培养纯度高、灵敏度高、识别抗原部位专一
(4)抗原一抗体杂交目的基因是否整合到受体细胞的染色体上。