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差速离心法与密度梯度离心法荧光标记法与同位素标记法方法提炼一差速离心法与密度梯度离心法.差速离心法1概念差速离心主要是采取逐渐提高离心速率分离不同大小颗粒的方法2原理在分离细胞中的细胞器时,将细胞膜破坏后,形成由各种细胞器和细胞中其他物质组成的匀浆,将匀浆放入离心管中,采取逐渐提高离心速率的方法分离不同大小的细胞器3具体操作起始的离心速率较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中收集沉淀,改用较高的离心速率离心上清液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的.密度梯度离心法1概念密度梯度离心法又称为区带离心法,可以同时使样品中几个或全部组分分离,具有良好的分辨率2原理不同颗粒之间存在沉降系数差时,在一定离心力作用下,颗粒各自以一定速度沉降,在密度梯度不同区域上形成区带的方法3操作离心时先将样品溶液置于一个由梯度材料形成的密度梯度液体柱中,离心后被分离组分以区带层分布于梯度柱中.密度梯度离心法和差速离心法的区别1差速离心法是用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离,密度梯度离心中单一样品组分的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的2差速离心用两个甚至更多的转速,而密度梯度离心只用一个离心转速3差速离心是适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分,而密度梯度离心的物质是密度有一定差异的
二、荧光标记法与同位素标记法.同位素标记法1同位素的概念在同一元素中,质子数相同、中子数不同的原子为同位素,如16与18012c与MJ⑵同位素的性质同位素的物理性质可能有差异,但组成的化合物化学性质相同3同位素标记法用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,就是同位素标记法4同位素标记法的应用同位素标记可用于示踪物质的运行和变化规律通过追踪同位素标记的化合物,可以弄清楚化学反应的详细过程⑸常用的同位素的类型生物学研究中常用的同位素有的具有放射性,如Me、32P、3H、35s等;有的不具有放射性,是稳定同位素,如AN、18等.荧光标记法生物材料荧光标记,就是一种生物材料可以发出荧光,那么就可以用它与另外一种物质结合在一起,因为它可以发出荧光,可以根据荧光出现的位置和亮度看另外一种物质所在的位置或者那种物质有多少.同位素标记技术与荧光标记技术的区别同位素标记技术,标记的是元素,可出现在不同化合物中,不会消失;荧光标记技术一般标记的是某种特定生物大分子,该分子分解则无荧光显现;两者均可用相关仪器检测追踪
1.观察细胞器的亚显微结构使用的工具和分离细胞器常用的方法分别是A.光学显微镜、同位素示踪法B.电子显微镜、同位素示踪法C.放大镜、差速离心法D.电子显微镜、差速离心法解析选D光学显微镜下观察到的为显微结构,同位素示踪法用于标记化学元素的来源去向,亚显微结构使用的工具是电子显微镜,分离细胞器常用的方法为差速离心法,D正确
2.下列经典实验与所用方法的对应关系,错误的是A.小鼠细胞和人细胞融合实验一一荧光标记法B.探究光合作用释放的O2的物质来源一一同位素标记法c.研究种群数量的变化趋势一一模型建构法D.DNA复制方式的证实——差速离心法解析选D小鼠细胞和人细胞融合实验中应用了荧光标记法,A正确;鲁宾和卡门用18标记水,证明光合作用所释放的02全部来自水,B正确;研究种群数量的变化趋势应用了模型建构法,C正确;DNA的复制为半保留复制,该结论是通过密度梯度离心的方法得出的,D错误
3.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因采用的方法是A.抗原一抗体杂交法B.蛋白质鉴定法C.mRNA杂交法D.放射性同位素标记的探针解析选D检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因采用的方法是DNA分子杂交技术即将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显现出杂交带,就表明目的基因已插入染色体DNA中,故D项正确,A、B、C项错误
4.如图是动植物细胞亚显微结构模式图请据图分析A:B1比较该图A、B两部分,在A、B细胞中都存在,且含有核酸的细胞器有填标号;若在高倍显微镜下,用B作实验材料观察
⑥是否适合?原因是⑵若B是低等植物细胞,其细胞质中的细胞器除图中所示外,还应有填名称;若B是蓝细菌细胞,其细胞质中的细胞器则只有[]o3在B细胞内可以同时进行光合作用和细胞呼吸而互不干扰,这种现象反映了生物膜系统的功能4科学家设计了如下实验将一个变形虫的核取出移植到正常的去核变形虫中经过一个细胞分裂周期,观察到分裂为两个子代变形虫,若想探究新形成的核膜中有没有来自旧核膜的成分,可用什么方法追踪?O解析
(1)在A、B细胞中都存在,且含有核酸的细胞器是核糖体和线粒体,即
③由于叶绿体的绿色会影响到对线粒体的观察,因此B不适合在高倍显微镜下用于观察线粒体
(2)若B是低等植物细胞,其细胞中还应该含有中心体;蓝细菌是原核细胞,只有
③核糖体一种细胞器
(3)在B细胞内可以同时进行光合作用和细胞呼吸而互不干扰,这种现象反映了生物膜系统的将各种细胞器分隔开、区域化,保证生命活动高效有序进行功能
(4)科学家设计了如下实验将一个变形虫的核取出移植到正常的去核变形虫中,经过一个细胞分裂周期,观察到分裂为两个子代变形虫,若想探究新形成的核膜中有没有来自旧核膜的成分,可用同位素标记法追踪旧核膜成分的去向答案
(1)
③⑥不适合叶绿体的绿色会影响到对线粒体的观察
(2)中心体
③核糖体
(3)将各种细胞器分隔开,保证生命活动高效有序进行
(4)同位素标记法。